1999 Fiscal Year Annual Research Report

細胞外基質による組織形成の制御

Research Project

Project/Area Number	11670001
Research Institution	Akita University
Principal Investigator	今井克幸秋田大学, 医学部, 助手 (80006741)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	妹尾春樹秋田大学, 医学部, 教授 (90171355)
Keywords	肝臓星細胞 / 肝実質細胞 / 共培養 / 組織形成 / 細胞外マトリックス / 活性持続型ビタミンC / 細胞接着 / コラーゲン
Research Abstract	正常ラット肝臓を門脈からコラゲナーゼで灌流し、低速遠心、Percoll密度勾配遠心法により、肝臓星細胞と肝実質細胞を単離し、性質の異なる種類の細胞外基質上、つまり、(A)なにも被覆しないポリスチレン培養皿の上、(B)I型コラーゲンゲルの上、および(C)マトリゲルの上に播種し2日間共培養した。細胞培養に際し、コラーゲンの合成と蓄積、細胞の増殖、および三次元組織構築を促進する目的で活性持続型ビタミンCであるL-アスコルビン酸2-リン酸(2×10^<-4>M)を培養液に添加した。これらの培養で形成された組織の三次元形態を走査型および透過型電子顕微鏡で解析した。ポリスチレン上とI型コラーゲンゲル上では平面に広がる組織を形成した。この組織内では肝実質細胞が互いにその側面で接着し単層の肝細胞索様の構造を形成した。しかしマトリゲル上ではさまざまな大きさで不規則な形の細胞塊をゲル上に形成した。この細胞塊の内部の細胞は壊死していた。I型コラーゲンゲル上の組織の電子顕微鏡解析では、実質細胞間に毛細胆管様の構造とtight junctionおよびdesmosomeの形成もみられた。星細胞は平板状に広がる実質細胞層の上面と下面にみとめられた。これらの細胞層間にはディッセ腔で見られるようにコラーゲン線維が介在し両細胞層の細胞はこれらのコラーゲン線維に接着していた。そこでポリスチレン培養皿上の培養系とI型コラーゲンゲル上培養系において、ビタミンCを添加した培養液と添加しない培養液をもちいて16日間共培養しその組織構築を比較した。その結果、ポリスチレン上ではビタミンCを添加した培養系でも塊状組織を形成し肝細胞索様構造は形成しなかった。またこの組織は培養皿底面との接着が弱く電顕用試料作成過程で培養皿底面から剥離し崩壊した。コラーゲンゲル上の組織は、ビタミンCを添加した培養系で、添加しない場合に比較してより広い面積の肝組織が形成された。この組織内の両細胞は細胞外マトリックス成分であるI型コラーゲン線維と接着構造を形成していた。これらの結果は細胞外マトリックス成分が組織構築過程を制御している可能性を示している。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Imai, K.: "Storage of lipid droplets in and production of extracellular matrix by hepatic stellate cells (vitamin A-storing cells) in Long-Evans cinnamon-like colored (LEC) rats"Anat.Rec. 258in press. (2000)
[Publications] Imai, K.: "Regulation of extracellular matrix production in the stellate cells - An analysis in the liver of LEC rats -"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 185-186 (1999)
[Publications] Senoo, H., Imai, K., et al.: "Vitamin A - storing system in mammals and birds in Arctic area - A study in the Svalbard archipelago -"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 34-35 (1999)
[Publications] Sato, M., Imai, K., et al.: "Intracellular signaling for process elongation in cultured hepatic stellate cells on type collagen gel"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 32-33 (1999)
[Publications] Kojima, N., Imai, K., et al.: "Alteration in distribution of focal adhesion components by signaling inhibitors in hepatic stellate cells and fibroblasts cultured on type I collagen gel"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 24-25 (1999)
[Publications] 佐藤充、今井克幸他: "I型コラーゲンゲル上で培養した肝臓星細胞における突起伸長のメカニズム:細胞内シグナル伝達機構"肝類洞壁細胞研究の進歩. 11. 71-74 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

細胞外基質による組織形成の制御

Principal Investigator

今井 克幸 秋田大学, 医学部, 助手 (80006741)

Research Products

[Publications] Imai, K.: "Storage of lipid droplets in and production of extracellular matrix by hepatic stellate cells (vitamin A-storing cells) in Long-Evans cinnamon-like colored (LEC) rats"Anat.Rec. 258in press. (2000)

[Publications] Imai, K.: "Regulation of extracellular matrix production in the stellate cells - An analysis in the liver of LEC rats -"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 185-186 (1999)

[Publications] Senoo, H., Imai, K., et al.: "Vitamin A - storing system in mammals and birds in Arctic area - A study in the Svalbard archipelago -"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 34-35 (1999)

[Publications] Sato, M., Imai, K., et al.: "Intracellular signaling for process elongation in cultured hepatic stellate cells on type collagen gel"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 32-33 (1999)

[Publications] Kojima, N., Imai, K., et al.: "Alteration in distribution of focal adhesion components by signaling inhibitors in hepatic stellate cells and fibroblasts cultured on type I collagen gel"Cells Hepatic Sinusoid. 7. 24-25 (1999)

[Publications] 佐藤 充、今井克幸 他: "I型コラーゲンゲル上で培養した肝臓星細胞における突起伸長のメカニズム:細胞内シグナル伝達機構"肝類洞壁細胞研究の進歩. 11. 71-74 (1999)

今井克幸秋田大学, 医学部, 助手 (80006741)

[Publications] 佐藤充、今井克幸他: "I型コラーゲンゲル上で培養した肝臓星細胞における突起伸長のメカニズム:細胞内シグナル伝達機構"肝類洞壁細胞研究の進歩. 11. 71-74 (1999)