1999 Fiscal Year Annual Research Report
トランスジェニックマウスを用いた始原生殖細胞における機能分子の解析
Project/Area Number |
11670211
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
木村 透 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (50280962)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊川 正人 大阪大学, 遺伝情報実験施設, 助手 (20304066)
仲野 徹 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (00172370)
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Keywords | 生殖系列 / 始原生殖細胞 / TNAP遺伝子 / Cre / loxP系 / 生殖質 / germ cell-less(gcl)遺伝子 |
Research Abstract |
有性生殖を担う生殖系列の細胞はすべて始原生殖細胞(PGC)より発生する。PGCは発生生物学的、医学的、進化論的に重要な細胞であるが、哺乳類においては技術的難点が多いため分子生物学的、細胞生物学的解析が非常に遅れている。 (1)PGCの精製法および可視化の系の確立 PGCのマーカーであるTNAP(tissue nonspecific alkaline phosphatase)遺伝子座に蛍光タンパクEGFP遺伝子を組み込んだマウスを作製した。このマウスを用いることでPGCの可視化、ほぼ純度100%のPGCの精製が可能になった。来年度はこのマウス系を用いて分子細胞生物学的解析を行う。 (2)in vivoにおけるCre/loxP系を用いたPGC特異的な遺伝子発現系の開発 in vivoにおいてPGCに遺伝子を発現させるためには、トランスジーンの効果によりトランスジェニックマウスが不稔になるのを防ぐ必要がある。そこで組換え酵素Cre発現マウスと交配したときのみ、トランスジーンを発現するマウスを作製した。現在、実際この系がうまく機能するかどうかを検討中である。 (3)哺乳類PGCにおける機能分子の解析 ショウジョウバエにおいてはPGCの分化、形成に関与する遺伝子が数多く報告されている。我々は、ショウジョウバエの生殖質のコンポーネントでありPGCの形成に必要な遺伝子germ cell-less(gcl)のマウス・ホモログをクローニングした。現在、生殖系列の発生におけるgclの機能を調べるために、遺伝子欠損マウスの作成やin vitroにおけるPGCへの遺伝子導入実験を行っている。
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[Publications] M.Fukushi et al.: "Identification and cloning of a novel cellular protein Nafl, Nef-associated factor 1, that increases cell surface CD4 expression"FEBS Letters. 442(1). 83-88 (1999)
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[Publications] Y.Suzuki et al.: "Determinant in human immunodeficiency virus type 1 for efficient replication under cytokine-induced CD4+ T-helper 1(Th1)-and Th2-type conditions"J. Virol.. 73(1). 316-324 (1999)
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[Publications] N.Motoyama et al.: "bcl-x prevents apoptotic cell death of both primitive and definitive erythrocytes at the end of maturation"J. Exp. Med.. 189(11). 1691-1698 (1999)
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[Publications] M.Matsumoto et al.: "Activation of the transcription factor ISGF3 by interferon-gamma"Biol. Chem.. 380(6). 699-703 (1999)
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[Publications] T.Kimura et al.: "Molecular cloning and genomic organization of mouse homologue of Drosophila germ cell-less and its expression in germ lineage cells"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 262(1). 223-230 (1999)
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[Publications] A.Kusunoki et al.: "Antisense oligodeoxynucleotide complementary to CXCR4 mRNA block replication of HIV-1 in COS cells"Nucleosides Nucleotides. 18(6-7). 1705-1708 (1999)