海外で感染する真菌症の原因菌の迅速同定法に関する研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11670259
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 三上 襄 千葉大学, 真菌医学研究センター, 助教授 (40092100)
• Keywords: 病原真菌 / ITS領域 / 遺伝子 / PCRプライマー / Paracoccidioides / Cryptococcus

Research Abstract

ブラジル国で分離した病原真菌Paracoccidioides brasiliensis(本邦で日系人を含むブラジル人から分離株を含む)について、リボゾームのITS領域である18S-5.8S-28S rRNAの遺伝子を解析して、本菌株に特異的なPCRによる同定用プライマーを作製した。本PCRプライマーは、P.brasiliensisのITS領域の418塩基を増幅するように設計されたもので、試験した29の菌株を全て同定することができた(ブラジル、ベネズエラ、アルゼンチン、コスタリカ、メキシコでの分離株を含む)。従って、海外よりの帰国者よりの本菌による原因菌の同定には、我々の作製した本PCRプライマーが有用であることが証明された(Imai T et al., Medical Mycology,in press)。
エイズ患者に特異的に感染する病原真菌Cryptococcus neoformans (Serotype B)が、その遺伝子パターンおよびITS領域の遺伝子配列から、4つのグループに別れることを見い出した。それぞれのグループは地域に特異的で、アジア型(2グループ)、アメリカ型(2グループ)に別れた。従って、分離されたこれらの菌株は遺伝子を解析することにより、地域が推定できることが明らかになった(Imai et al., Clinical Laboratory,in press)。
タイ国のエイズ患者から分離したHistoplasma capsulatum株については、ITSおよびETSの塩基配列を決定し,その塩基配列を北米株や南国株と比較した結果、タイ株は独立したグループを形成することが明らかになった。また。すでにタイ国の研究者との共同研究で作製した同定用プライマーが、本菌種の同定にも極めて有用であることを、本邦での工イズ患者(外国人)から分離した菌株を用いた試験でも確認することができた。

Research Products

• [Publications] Myoken Y et al.: "Antifungal susceptibility of Aspergillus species isolated from invasive oral infection in neutropenic patients with hematologic malignancies"Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 87. 174-179 (1999)
• [Publications] Aoki FH et al.: "New PCR primer pairs specific for Cryptococcus neotormans serotype A or B prepared on the basis of random amplifed polymorphic DNA fingerprint pattern analysis"J Clin Microbiol. 37. 315-320 (1999)
• [Publications] 小島正裕 他: "フルコナゾール耐性Candida albicansに対するDO870の抗真菌活性"真菌誌. 40. 209-215 (1999)
• [Publications] 別所涼子 他: "真菌性角膜潰瘍"日本の眼科. 70. 1149-1152 (1999)
• [Publications] Yang HC et al.: "Extrusion of fluorescein diacetate by multidrug-resistant Candida albicans"Mycoses. (in press). (1999)
• [Publications] Tamura M 他: "New PCR Primer pairs specific for Candida dubliniensis and detection of the fungi from the Candida albicans clinical isolates in Japan"Clinical Laboratory. 46. 33-40 (2000)