2001 Fiscal Year Annual Research Report
NF-kB活性化の選択的阻止による重症急性膵炎の治療法の開発 -NLS-IkBα組み換えアデノウィルスを用いた基礎検討-
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11670472
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| Research Institution | TOHOKU UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
下瀬川 徹 東北大学, 大学院医学系研究科, 教授 (90226275)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
正宗 淳 東北大学, 大学院医学系研究科, 助手 (90312579)
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| Keywords | 重症急性膵炎 / NF-kB / NLS-IkBα / 組み替えアデノウィルス / 治療 / PDTC / N-acetyl cysteine(NAC) / ICAM-1 |
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| Research Abstract |
平成11年度は、核局在シグナルを結合させたIkBα cDNAの組み換えアデノウィルスベクター(NLS-IkBα)の作成を試みた。しかしながら、正確な配列のIkBαとSV40 large T抗原cDNAを得ることが難渋した。一方、アデノウィルスへのコンストラクトが組み込み可能かどうかも検討したが、こちらも充分な組み込みが得られず再検討が必要となった。アデノで挿入可能な遺伝子導入は、CAプロモーター付きで5kbまでとされているがIkBαのコンストラクトのサイズが3720 bpと大きいため、充分な組み込みが得られなかった。そこで、NF-kBの特異的阻害剤であるPDTC,NACを用いて、in vivoにおけるNF-kBの活性化抑制が、致死性膵炎モデルであるタウロコール酸膵炎(TCA膵炎)ラットやTCA膵炎腹水清(P-AAF)の軽症膵炎ラット腹腔内への移入モデルで生じる肺障害を軽減するか検討した。PDTC, NACはこれら致死性膵炎モデルの肺障害を軽減し、生存率を著しく改善した。その効果はNF-kB活性化の阻害による肺でのTNF-α、IL-1βの産生抑制が一因と考えられた。平成12年度と13年度も引き続き、NLS-IkBa組み換えアデノウィルス作製を継続している。なお、in vivoで認められたNF-kBの抑制による重症膵炎モデルの病態改善の機序を明らかにするため、血管内皮細胞や単球の培養細胞系を用いて、PAAF中にNF-kBを直接活性化して接着分子やIL-6、IL-8の発現を誘導する因子が存在することを証明した。また、NF-kBの阻害がこれらの発現を抑制することも確認できた。
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[Publications] 下瀬川 徹: "Inhibition of NF-kB activation improves the survival of rats with t aurocholate pancreatitis"GUT. 44. 253-258 (1999)
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[Publications] 下瀬川 徹: "Ascites of rat experimental model of severe acute pancreatitis induces lung injury"Pancreas. 22. 409-418 (2001)
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[Publications] 下瀬川 徹: "Specific induction of adhesion molecules in human vascular endothelial Cells by rat experimental pancreatitis-associated"Pancreas. 18. 141-150 (1999)
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[Publications] 下瀬川 徹: "Ascites of severe acute pancreatitis in rats transcriptionally Upregulates expression of IL-6 and-8 in vascular endothelium"Digestive Disease and sciences. 45. 429-437 (2000)
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[Publications] 正宗 淳: "Expression of survirin is correlated with cancer cell apoptosis and is involved in the development of human pancreatic duct"Cancer. 92. 271-278 (2001)
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[Publications] 下瀬川 徹: "急性膵炎重症化の機序"日本消化器病学会会誌. 98. 1029-1036 (2001)
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[Publications] 下瀬川 徹: "肝胆膵"アークメディア. 9 (2001)
