オステオポンチによる障害肝でのマクロファージ浸潤機構の解明

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11670529
• Research Institution: Saitama Medical University
• Principal Investigator: 持田 智 埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (20219968)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 稲生 実枝 埼玉医科大学, 医学部, 助手 (70286037) ; 松井 淳 埼玉医科大学, 医学部, 助手 (40260484)
• Keywords: オステオポンチン / 肝マクロファージ / 劇症肝炎 / 広汎肝壊死 / Propionibacterium acnes / MCP-1 / MIP-1α / ケモカイン

Research Abstract

オステオポンチン(Osp)の遺伝子型がAllele AであるBalb/cマウスでは,Propionibacterium acnes(P.acnes)の加熱死菌を静注すると,1日後より肝におけるOsp mRNA発現が増強し,3日後に最大となった。このマウスでは,肝へのマクロファージ浸潤が1日後より認められるようになり,3日後には肉芽腫形成も生じ,これらの程度は5〜7日後にかけて最大となった。一方,遺伝子型がAllele BのC3H/HeJないしCBA/Jマウスでは,P.acnes死菌静注後の肝におけるOsp mRNAの発現増強は認められず,マクロファージ浸潤及び肉芽腫形成の程度も軽微であった。しかし,肝におけるMCP-1やMIP-1αのmRNA発現は,何れのAlleleのマウスでもP.acnes死菌投与後に高度となった。以上の成績より,マクロファージの肝浸潤に際して,Ospは各種chemokineの中で最も重要な役割を担っていることが判明した。現在はchemokine networkにおけるOspの位置付けを明らかにするためにin vitroの実験を推進している。ラットより単離したKupffer細胞や肝マクロファージにMCP-1やMIP-1αを添加して培養したが,Osp mRNAの発現には変化が認められなかった。Ospが他のchemokine発現に及ぼす影響や,マクロファージとともにOspを発現する肝星細胞におけるOsp発現調節機構を検討中である。
また,ヒト劇症肝炎症例における検討も開始した。広汎肝壊死の成立には活性化肝マクロファージの惹起する類洞内凝固が関与すると考えられているが,剖検肝を用いた免疫組織染色により劇症肝炎ではマクロファージにおけるOsp発現が著しく高度であることが明らかになった。劇症肝炎,特に急性型では血漿Osp濃度が高値であることも見出しており,一連の検討から広汎肝壊死の成立機序を解明するとともに,肝炎劇症化の予知法を確立できる可能性も浮上してきている。

Research Products

• [Publications] Kawashima R, Mochida S, Matsui A, et al.: "Expression of osteopontin in Kupffer cells and hepatic macrophages and stellate cells in rat liver after CCl_4-intoxication: A possible factor for macrophage migration into hepatic necrotic areas"Biochem Biophys Res Commun. 256. 527-531 (1999)
• [Publications] Mochida S, Arai M, Ohno A, et al.: "Deranged Blood Coagulation equilibrium as a factor of massive liver necrosis following endotoxin administration in partially hepatictomized rats"Hepatology. 29. 1532-1540 (1999)
• [Publications] Arai S, Mochida S, Ohno A, et al.: "Decreased expression of receptors for Vascular endothelial growth factor and sinusoidal endothelial cell damage in cold preserved rat liver"Transplant Proc. 31. 2668-2672 (1999)
• [Publications] Mashiba S, Mochida S, Ishikawa K, et al.: "Inhibition of hepatic stellate cell contraction during activation in vitro by vasculer endothelial growth factor in association with upregulation of FLT tyrosi kirase recej family, flt"Biochem Biophys Res Commun. 258. 674-678 (1999)
• [Publications] Mashimo Y, Mochida S, Inao M, et al.: "Decreased expression of Smooth muscle α actin in activated rat hepatic stellate cells at the S-phase of the cell cycle in vitro"Hepatology Res. 15. 22-31 (1999)
• [Publications] Ishikawa K, Mochida S, Mashiba S, et al.: "Expression of Vascular endothelial growth factor in non-parenchymal as well as parenchymal cells in rat liver after necrosis"Biochem Biophys Res Commun. 254. 587-593 (1999)
• [Publications] Mochida S, Ishikawa K, Mashiba S, et al.: "The cells of the Hepatic Sinusoid."Wiss E, et al. (eds) Kupffer cell Foundation, Netherland,(in press). (2000)