2000 Fiscal Year Annual Research Report
パーキンソン病における黒質神経細胞死の神経栄養因子・遺伝子導入に抑制の研究-神経栄養因子Human pigment epithelial-derived factor蛋白および遺伝子導入による神経細胞死の抑制-
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11670640
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| Research Institution | JUNTENDO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
森 秀生 順天堂大学, 医学部, 助教授 (30150634)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
水野 美邦 順天堂大学, 医学部, 教授 (30049043)
望月 秀樹 順天堂大学, 医学部, 講師 (90230044)
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| Keywords | PEDF / 神経栄養因子 / 黒質神経細胞死 / パーキンソン病 / レトロウィルスベクター / アストロサイト / マイクログリア / 移植 |
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| Research Abstract |
1.神経栄養因子PEDFの黒質ドーパミン神経細胞に対する作用の検討
昨年度にひき続き胎生ラットより分散培養した黒質ドーパミン神経細胞に対するhrPEDFの作用を免疫組織学的方法により検討した.また,抗hrPEDF抗体を用いて,hrPEDFの特異性を確認した.結果:hrPEDF処理による,培養黒質ドーパミン神経細胞の生存細胞数の有意の増加と神経突起の進展を認めた.抗hrPEDF抗体によりhrPEDFの黒質ドーパミン神経細胞生存維持効果の阻害がみられた.PEDFに小脳顆粒細胞,グリア細胞に加え,今回の黒質ドーパミン神経細胞に神経栄養因子としての作用が認められたことから,中枢神経において重要な役割を果たしている可能性が強く示唆された.
2.PEDFの遺伝子導入
AV virus vector作製はすべてのウイルス蛋白を作製できるpackaging plasmidと目的遺伝子とCAGプロモター配列とpolyAの両端にinverted terminal repeat(ITR)配列を有するvector plasmidをHela細胞にアデノウイルスとco-transfectionした。Adeno-associated virus vector -AAV-にPEDFを組み込みまた遺伝子導入のマーカーとして同時にIRES-internal rebosomal entry site-を用いてレポター遺伝子であるGFP-green fluorecence protein)の2種類の遺伝子を導入した.定位脳手術法により、マウスの線条体にAAV-EGFPを注入した。線条体のほとんどに導入することが可能であることがGFPの発現により確認された。まretrogradeに黒質にvirus vectorを導入することが可能であるこも確認された。
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[Publications] Takanashi M,Mochizuki H,Yokomizo K Hattroi N,Mori H,Yamamura Y,Mizuno Y :: "Iron accumulation in the substantia nigra of autosomal recessive juvenile parkinsonism (ARJP)"Parkinson disease and related disorders.. (in press). (2001)
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[Publications] Tanaka R,Kobayashi T,Motoi Y,Anno M,Mizuno Y,Mori H: "A case of frontotemporal dementia with tau P301L mutation in the Far East"J Neurol. 247. 705-707 (2000)
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[Publications] Okuma Y,Urabe,T,Mochizuki H,Miwa H,Shimo Y,Mori H,Mizuno Y: "Asymmetric cortico-cortical inhibition in patients with progressive limb-kinetic apraxia"Acta Neurol Scand. 102. 244-248 (2000)
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[Publications] Mlzuno Y,Hattori N,Mori H: "Genetics of Parkinson's disease."Biomed Pharmacother. 59. 109-116 (1999)
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[Publications] Sugita Y,Zhao B,Shankar P,Dunbar CE,Doren S,Young HA,Schwartz JP: "CNS interleukin-3(IL-3) expression and neurological syndrome in antisense-IL-3 transgenic mice."J Neuropathol Exp Neurol. 58. 480-488 (1999)
