1999 Fiscal Year Annual Research Report
顆粒球系分化誘導に伴う核分葉における細胞骨格蛋白ミオシンIIの役割
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11670992
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
西川 政勝 三重大学, 医学部・附属病院, 講師 (30144257)
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| Keywords | HL-60細胞 / ミオシンII / 核分葉 / ミオシンホスファターゼ / Rho-キナーゼ |
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| Research Abstract |
白血病細胞株HL-60およびNB-4を用いてレチノイン酸(ATRA)による顆粒球系細胞分化に伴うミオシンIIAおよびIIB、ミオシンホスファターゼRho-キナーゼの変動をそれぞれの特異抗体を用いてWestern blot法により検討した。ミオシンIIA及びIIBはともにHL-60細胞に発現しているが、IIAの発現がより豊富に存在していた。ミオシンIIAの発現は既報にあるが如く顆粒球系分化誘導に伴い増加したがミオシンIIBの発現は殆んど変化しなかった。ミオシンホスファターゼ酵素はPP1δ触媒サブユニット、ミオシン結合サブユニット(MBS)と20Kサブユニット(M20)より成っていることが平滑筋や血小板で報告されている。いずれのサブユニットもHL-60細胞に存在していた。ATRAによる分化誘導によるMBSの発現変動は殆ど認められなかった。一方、Rho-キナーゼは漸増する傾向が認められた。現在、ATRAによるHL-60の分化誘導に伴うミオシンIIやアクチンの局在の変化を核の形態変化と関係づけながら共焦点レーザー顕微鏡を用いて検討を行っている。線維芽細胞ではアクチンはストレスファイバーとして認められるが、白血病細胞株であるHL-60やNB-4ではストレスファイバーは観察されなかった。HL-60やNB-4細胞ではアクチンやミオシンIIAは核近傍により局在することが明らかとなった。また、ホルボールエステルで単球系細胞に分化誘導すると、アクチンやミオシンIIAが接着班などと考えられる細胞周囲に局在するようになることが判明した。今後、顆粒球系細胞分化に伴う核の分葉とミオシンIIAやIIBの局在、Rho-キナーゼ阻害剤など作用を検討する予定である。
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[Publications] Shikami M,Miwa H,Nishikawa M,et al.: "Low bcl-2 expression in acute leukemia with t(8;21) chromosomal abnormality"Leukemia. 13. 358-368 (1999)
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[Publications] Suzuki Y,Yamamoto M,Wada H,Nishikawa M,et al.: "Agonist-induced regulation of myosin phosphatase activity in human platelets through activation of Rho-kinase"Blood. 93. 3408-3417 (1999)
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[Publications] Yamamoto M,Suzuki Y,Kihira H,Nishikawa M,et al.: "Expression of four major protein ser/Thr phosphatases in human primary leukemic cells"Leukemia. 13. 595-600 (1999)
