2000 Fiscal Year Annual Research Report

カニクイザル個体をモデルにした造血系の動態解析

Research Project

Project/Area Number	11671014
Research Institution	Jichi Medical School
Principal Investigator	花園豊自治医科大学, 医学部, 講師 (70251246)
Keywords	造血幹細胞 / 遺伝子治療 / レトロウイルスベクター / Inverse PCR / カニクイザル / 霊長類モデル
Research Abstract	(1)カニクイザル造血幹細胞の遺伝子標識研究:昨年度、我々はカニクイザルを用いて造血幹細胞の自家移植の系を樹立した。移植した造血幹細胞の増殖・分化を体内において追跡するためには、移植細胞をあらかじめGFP等のマーカー遺伝子で標識しておくことが必要になる。そこで我々は昨年度に引き続き、green fluorescent protein(GFP)を発現するレトロウイルスベクターを用いてカニクイザル骨髄CD34^+細胞へ遺伝子導入を行った。そして遺伝子導入したCD34^+細胞を自家移植することにより、体内における造血幹細胞の増殖・分化を追跡できるかどうか調べた(9頭)。その結果、未熟な造血細胞(コロニー形成細胞)では、5-40%の細胞にGFP遺伝子導入が可能であることがわかった。一方、分化した血液細胞には、GFP遺伝子導入細胞はほとんど出現しないことがわかった。このことからGFPはカニクイザルの造血幹細胞において分化障害を引き起こす可能性が示唆された。現在、このGFPの毒性を回避する方法を検討している。 (2)Inverse PCR法によるレトロウイルスベクター挿入部位の解析:カニクイザルのような霊長類で、移植後の造血幹細胞の動態をクローナルに解析した例はほとんどない。この解析は、Inverse PCR法によってレトロウイルスベクター挿入部位に続くゲノム側の領域をクローニングすることによって可能である。ただしこの方法を移植後のカニクイザルの造血動態の解析に応用するためには、十分に高い遺伝子導入効率が求められる。我々のカニクイザルを用いた検討では、移植後の未熟な造血細胞(コロニー形成細胞:CFU)では5-40%の細胞に遺伝子導入が可能であり、こうした解析が可能である。現在、移植後のカニクイザル造血前駆細胞(CFU)におけるレトロウイルスベクター挿入部位の解析をInverse PCR法によって進めている。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Gene transfer into nonhuman primate hematopoietic stem cells : implications for gene therapy."Stem Cells. 19巻. 12-23 (2001)
[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Primary T lymphocytes as targets for gene therapy."J.Hematoth.Stem Cell. 9巻. 611-620 (2000)
[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Introduction of a xenogeneic gene via hematopoietic stem cells leads to specific tolerance in a rhesus monkey model."Mol.Ther.. 1巻. 533-544 (2000)
[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Basic studies toward hematopoietic stem cell gene therapy.In Cell Therapy"Springer-Verlag Tokyo (edited by Ikeda,Y.,Hata,J.,Koyasu,S.,Kawakami,Y.,Hattori,Y.). 11 (2000)
[Publications] Ozawa,K. et al.: "Adeno-associated virus (AAV) vectors and gene therapy of Parkinson's disease.In Progress in Gene Therapy : Basic and Clinical Frontiers"VSP Boston (edited by Bertolotti,R.,Parvez,S.H.,and Nagatsu,T.). 18 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

カニクイザル個体をモデルにした造血系の動態解析

Principal Investigator

花園 豊 自治医科大学, 医学部, 講師 (70251246)

Research Products

[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Gene transfer into nonhuman primate hematopoietic stem cells : implications for gene therapy."Stem Cells. 19巻. 12-23 (2001)

[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Primary T lymphocytes as targets for gene therapy."J.Hematoth.Stem Cell. 9巻. 611-620 (2000)

[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Introduction of a xenogeneic gene via hematopoietic stem cells leads to specific tolerance in a rhesus monkey model."Mol.Ther.. 1巻. 533-544 (2000)

[Publications] Hanazono,Y. et al.: "Basic studies toward hematopoietic stem cell gene therapy.In Cell Therapy"Springer-Verlag Tokyo (edited by Ikeda,Y.,Hata,J.,Koyasu,S.,Kawakami,Y.,Hattori,Y.). 11 (2000)

[Publications] Ozawa,K. et al.: "Adeno-associated virus (AAV) vectors and gene therapy of Parkinson's disease.In Progress in Gene Therapy : Basic and Clinical Frontiers"VSP Boston (edited by Bertolotti,R.,Parvez,S.H.,and Nagatsu,T.). 18 (2000)

花園豊自治医科大学, 医学部, 講師 (70251246)