1999 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
11671064
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Research Institution | Fukuoka University |
Principal Investigator |
松永 彰 福岡大学, 医学部, 講師 (60221587)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 淳 福岡大学, 医学部, 助教授 (90122697)
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Keywords | リポ蛋白糸球体症 / 遺伝子変異 / トランスジェニックマウス / アポE |
Research Abstract |
リポ蛋白糸球体症(Lipoprotein glomerulopathy)は、日本で発見された新しい腎疾患である。我々は、多施設共同研究により、このリポ蛋白糸球体症の原因と密接に関係するアポ蛋白E変異体、アポE2 Sendai(Arg145Pro)、アポE2 Kyoto(Arg25Cys)、アポE1(del141-143)、アポE1(del156-173)の4種を発見した。今回の研究ではアポE変異とリポ蛋白糸球体症の関連及び発症機序を解明するため、アポE1(del141-143)モデルマウスを作製することとした。プロモータ部位を含む正常アポE遺伝子(11.5kb)に、アポE1(del141-143)変異をsite directed mutagenesisを用いて導入した。アポE遺伝子の全配列をオートシークエンサーにて確認し、変異を導入されたアポE遺伝子は、制限酵素HindIIIで切断し、直線鎖DNAとして精製。共同研究を行うため、熊本大学動物資源開発研究センターに輸送した。熊本大学にて単離直線化アポE遺伝子をミクロマニピュレーターにより受精卵の前核に注入し、偽妊娠仮親C57BL/6雌マウスの卵管に移植した。しかし、センターで病原ウイルス感染に遭遇し、初回に得られたトランスジェニックマウスは屠殺された。現在は、再度遺伝子注入を行っている段階である。これと平行し、機能解析を行うため、site directed mutagenesisを用いてリポ蛋白糸球体症のアポE変異4種を大腸菌に発現させ精製する研究を行っている。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Matsunaga A,et al.: "Compound heterozygosity for an apolipoprotein A1 gene promoter mutation and structural nonsense mmutation with apolipoprotein A1 deficiency."Arterioscler Thromb Vasc Biol. 19. 348-355 (1999)
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[Publications] Han H,Sasaki J,Matsunaga A,et al.: "A novel mutant,ApoA-I Nichinan(Glu235→0),is associated with low HDL cholesterol levels and decreased cholesterol efflux from cells."Arterioscler Thromb Vasc Biol. 19. 1447-1455 (1999)
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[Publications] Matsunaga A,et al.: "A novel apolipoprotein E mutation,E2(Arg25Cys) in lipoprotein glomerulopathy."Kidney International. 56. 421-427 (1999)
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[Publications] Ando M,Sasaki J,Han H,Matsunaga A,et al.: "A novel I8-amino acid deletion in apolipoprotein E associated with lipoprotein glomerulopathy."Kidney International. 56. 1317-1323 (1999)
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[Publications] Konishi K,et al.: "Association of a novel 3-amino acid deletion mutation of a polipoprotein E(apo E Tokyo) with lipoprotein glomerulopathy."Nephron. 83. 214-218 (1999)