神経性食欲不振症の神経ペプチドおよび脳内アミン受容体の遺伝子解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671098
• Research Institution: Tokyo Women's Medical University
• Principal Investigator: 鈴木 眞理 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (90128140)
• Keywords: Anorexia nervosa / Corticotropin-releasing factor receptor gene / RFLP / PCR

Research Abstract

対象は1990年の厚生省調査研究班神経性食欲不振症の診断基準を満たす女性患者15名で、同疾患の家族内発症を有する。心身症や精神疾患の既往がなく、調査の限りでは神経性食欲不振症の家族歴のない30才以上の健康女性10名を対照とした。ヘパリン加末梢血液からシュクロース勾配法にて白血球を分離し、ゲノムDNAを抽出した。得られたゲノムDNAを21種類の制限酵素で消化し、0.8%アガロースゲルで電気泳動後、ヒトCorticotroppin-releasing factor受容体2型(CRFR2)cDNA全長をプローブにしてサザンブロット法にてRFLPの検出を行ったが、神経性食欲不振症患者と健康女性ともにRFLPを認めなかった。ゲノムDNAは、既報のヒトCRFR2のシークエンスに従って、イントロン内にプライマーを設定してエクソンごとにDNA断端をPCR法にて増幅後、その産物をシークエンスした。エクソン1-12とそれぞれのエクソン前後のイントロン30塩基には点変異を認めず、塩基配列はよく保存されていた。
平成11年度に解析したCRFR1では、15名中4名に、エクソン9とその前後のイントロンに複数の点変異を認めた。これを確認するため、新たにprimerを作成し、解析したところ、エクソン前後のイントロン30塩基には点変異を認めず、塩基配列はよく保存されており、昨年度の解析結果を修正した。

Research Products

• [Publications] Mari Hotta et al.: "Fibroblast growth factor inhibits locomotor activity as well as feeding behavior of rats."Eur J Pham (in press). (2001)
• [Publications] Hideki Kuriyama,Mari Hotta et al.: "A 6-day intracerebroventricular infusion of the growth hormone-releasing peptide KP-102 stimulating food intake in both non-stressed and intermittently-stressed rats."Neurosci Letters. 282. 109-112 (2000)
• [Publications] 堀田眞理 他: "内分泌疾患総合医療センター内科における神経性食欲不振症患者の実態-1999年1年間の初診患者の検討-"東京女子医科大学雑誌. (in press). (2001)
• [Publications] 岡地理恵,地曵和子,堀田眞理 他: "高感度エストラジオールキットの基礎的および臨床的検討"医学と薬学. 43. 1167-1174 (2000)
• [Publications] 鈴木眞理: "拒食症に見る子どもの心"体育科教育. 48. 20-25 (2000)