1999 Fiscal Year Annual Research Report
若年発症インスリン非依存性糖尿病におけるHNF転写調節カスケードの研究
| Project/Area Number |
11671104
|
|---|
| Research Institution | Tohoku University |
|---|
Principal Investigator |
檜尾 好徳 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (10282071)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平井 完史 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (80312578)
鈴木 進 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (70216399)
|
|---|
| Keywords | 糖尿病 / MODY / HNF |
|---|
| Research Abstract |
近年MODYにおけるHNF(Hepatocyte nuclear factor)-1α、1β、4αおよびglucokinase遺伝子の異常が明らかとなっている。ヒトHNF-3β遺伝子構造の決定、日本人MODY患者における遺伝子変異スクリーニングおよびその結果得られた変異HNF-3β遺伝子について機能解析を行った。<対象>69名の日本人MODY患者DNAおよび70名の日本人非糖尿病者DNAに対し,変異スクリーニングを行った。<方法>HNF-3β遺伝子構造とpromoter領域の塩基配列を決定し、変異スクリーニングの結果同定されたHNF-3β遺伝子に関して、正常HNF-3βcDNAにそれぞれの変異を導入しHNF-1αおよび4αの5'上流領域断片を用いて機能解析を行った。<結果>ヒトHNF-3β遺伝子は3exonからなり、蛋白は458個のアミノ酸で構成されマウスHNF-3βとは約98%の相同性を示した。また5'上流領域にはHNF-3β自身およびHNF-6蛋白の結合部位を認めた。日本人MODY患者に対するスクリーニングの結果、4種の多型および2種のミスセンス変異(S109N,A328V)を認め、特にS109Nは種を超えて高い保存性が認められた。HNF-3βはHNF-1αおよびHNF-4α遺伝子の転写を有意に増加させ(p<0.01)、それぞれの転写を調節していることが示唆された。またS109Nは、HeLa細胞において正常3βに比しHNF-1αの転写を有意に低下させた(P<0.05)。<結論>ヒト完全長HNF-3β遺伝子をクローニングした。HNF-3βがHNF-1αおよび4α遺伝子の転写を調節していること、また変異HNF-3βがHNF-1αの転写を低下させることを認めた。<新知見>HNF-3β遺伝子が糖尿病発症に関与している可能性が示唆された。
|
