2000 Fiscal Year Annual Research Report

ホスホジエステラーゼ3B遺伝子の転写活性化因子の同定と解析

Research Project

Project/Area Number	11671124
Research Institution	Ehime University School of Medicine
Principal Investigator	大澤春彦愛媛大学, 医学部, 助教授 (90294800)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	大沼裕愛媛大学, 医学部, 助手 (00294794) 牧野英一愛媛大学, 医学部, 教授 (50009578)
Keywords	ホスホジェステラーゼ / インスリン抵抗性 / 脂肪分化 / 転写 / プロモーター / 糖尿病 / 脂肪細胞 / 遺伝子
Research Abstract	ホスホジェステラーゼ3B(PDE)は脂肪細胞に特異的に発現し、インスリンの抗脂肪分解作用を媒介する。脂肪細胞におけるPDEの活性化の増強は、血中遊離脂肪酸(FFA)の低下を介してインスリン抵抗性を改善する事が予想される。申請者らは、平成11年度、インスリン抵抗性肥満糖尿病のKKAyマウスにおいて、低下した脂肪細胞のPDEの発現が、インスリン抵抗性改善薬により増加し、FFAの低下と共にインスリン抵抗性が改善する事を見出した(1)。平成12年度、PDEの発現の増加は、in vitroでは3T3-L1細胞が脂肪細胞へ分化誘導後の早期に認められることをreal time RT-PCRにより確認した。次いでクローニングしたマウスPDEの5'領域について2kbまでの塩基配列を決定しコンピューター解析した結果、C/EBPなどの脂肪分化に重要な転写因子の結合部位があることを見出した。更に、転写開始点を決定し、プロモーター活性を解析するためにルシフェラーゼのレポーターコンストラクトを作成した。トランスフェクションにより、2kbまでの領域は分化前の3T3-L1細胞においてプロモーター基礎活性を有する事を確認した。更に脂肪細胞への分化誘導によりプロモーター活性が増強されることを確認した。従って、この領域内に脂肪分化によるPDEの転写活性化に重要なDNAエレメントの存在が示唆された。今後、インスリン抵抗性改善剤の新たな標的としてDNAエレメント及びその結合因子の同定を進めていく予定である。文献1)Tang Y.,Osawa,H.,Onuma,H.,et al.Improvement in insulin resistance and the restoration of reduced PDE3B gene expression by pioglitazone in adipose tissue of obese,diabetic KKAy mouse.Diabetes 48:1830,1999.

Research Products

(13 results)

All Other

All Publications (13 results)

[Publications] Tang Y.: "Improvement in insulin resistance and the restoration of reduced PDE3B gene expression by pioglitazone in adipose tissue of obese, diabetic KKAy mouse."Diabetes. 48. 1830-1835 (1999)
[Publications] Yamada,K: "Human ZHX1 : cloning, chromosomal location, and interaction with transcription factor NF-Y."Biochem Biophys Res Commun. 261. 614-621 (1999)
[Publications] Niiya,T.: "A complete defficiency of coagulation factor XIII A-subunit due to a novel compound heterozygote of Ser 413 Leu missense and an nt 389 (ins G) frame shift mutations."Br J Haematol. 107. 772-775 (1999)
[Publications] Yamada,K: "Identification of proteins that interact with NF-YA."FEBS Lett. 460. 41-45 (1999)
[Publications] Ishizuka N.: "Tumor necrosis factor alpha signaling pathway and apoptosis in pancreatic beta cells."Metabolism. 48. 1485-1492 (1999)
[Publications] Kuramoto N: "Effect of ACE gene on diabetic nephropathy in NIDDM patients with insulin resistance."Am J Kidney Dis. 33. 276-281 (1999)
[Publications] Sakurai K.: "Mutations in the hepatocyte nuclear factor-4alpha gene in Japanese with non-insulin-dependent diabetes : a nucleotide substitution in the polypyrimidine tract of intron 1β."Horm Metab Res. 32. 316-320 (2000)
[Publications] Wang,J-C.: "Transducin-like enncer of split proteins, the human homologs of drosophila groucho, interact with hepatic nuclear factor 3β."J Biol Chem. 275. 18418-18423 (2000)
[Publications] Osawa,H.: "Identification of novel C253Y missense and Y864X nonsense mutations in the insulin receptor gene in type A insulin resistant patients."Clin Genet. (in press). (2001)
[Publications] 大澤春彦,大沼裕,牧野英一: "HbA1cの活用.軽症糖尿病早期発見・早期管理."河盛隆造,門脇孝編、中外医学社、東京、. 92-98 (1999)
[Publications] 大澤春彦,牧野英一: "臨床診断の進め方プラクティカル内科シリーズNo.6糖尿病"岩本安彦編、南江堂、東京. 21-27 (1999)
[Publications] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c 検査値のみかた改訂2版"中井利昭編、中外医学社東京、. 439-442 (2000)
[Publications] 大澤春彦,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構編"メヂカルビュー社、東京. (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

ホスホジエステラーゼ3B遺伝子の転写活性化因子の同定と解析

Principal Investigator

大澤 春彦 愛媛大学, 医学部, 助教授 (90294800)

Research Products

[Publications] Tang Y.: "Improvement in insulin resistance and the restoration of reduced PDE3B gene expression by pioglitazone in adipose tissue of obese, diabetic KKAy mouse."Diabetes. 48. 1830-1835 (1999)

[Publications] Yamada,K: "Human ZHX1 : cloning, chromosomal location, and interaction with transcription factor NF-Y."Biochem Biophys Res Commun. 261. 614-621 (1999)

[Publications] Niiya,T.: "A complete defficiency of coagulation factor XIII A-subunit due to a novel compound heterozygote of Ser 413 Leu missense and an nt 389 (ins G) frame shift mutations."Br J Haematol. 107. 772-775 (1999)

[Publications] Yamada,K: "Identification of proteins that interact with NF-YA."FEBS Lett. 460. 41-45 (1999)

[Publications] Ishizuka N.: "Tumor necrosis factor alpha signaling pathway and apoptosis in pancreatic beta cells."Metabolism. 48. 1485-1492 (1999)

[Publications] Kuramoto N: "Effect of ACE gene on diabetic nephropathy in NIDDM patients with insulin resistance."Am J Kidney Dis. 33. 276-281 (1999)

[Publications] Sakurai K.: "Mutations in the hepatocyte nuclear factor-4alpha gene in Japanese with non-insulin-dependent diabetes : a nucleotide substitution in the polypyrimidine tract of intron 1β."Horm Metab Res. 32. 316-320 (2000)

[Publications] Wang,J-C.: "Transducin-like enncer of split proteins, the human homologs of drosophila groucho, interact with hepatic nuclear factor 3β."J Biol Chem. 275. 18418-18423 (2000)

[Publications] Osawa,H.: "Identification of novel C253Y missense and Y864X nonsense mutations in the insulin receptor gene in type A insulin resistant patients."Clin Genet. (in press). (2001)

[Publications] 大澤春彦,大沼裕,牧野英一: "HbA1cの活用.軽症糖尿病 早期発見・早期管理."河盛隆造,門脇孝編、中外医学社、東京、. 92-98 (1999)

[Publications] 大澤春彦,牧野英一: "臨床診断の進め方 プラクティカル内科シリーズNo.6糖尿病"岩本安彦編、南江堂、東京. 21-27 (1999)

[Publications] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c 検査値のみかた 改訂2版"中井利昭編、中外医学社 東京、. 439-442 (2000)

[Publications] 大澤春彦,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構 編"メヂカルビュー社、東京. (2000)

大澤春彦愛媛大学, 医学部, 助教授 (90294800)

[Publications] 大澤春彦,大沼裕,牧野英一: "HbA1cの活用.軽症糖尿病早期発見・早期管理."河盛隆造,門脇孝編、中外医学社、東京、. 92-98 (1999)

[Publications] 大澤春彦,牧野英一: "臨床診断の進め方プラクティカル内科シリーズNo.6糖尿病"岩本安彦編、南江堂、東京. 21-27 (1999)

[Publications] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c 検査値のみかた改訂2版"中井利昭編、中外医学社東京、. 439-442 (2000)

[Publications] 大澤春彦,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構編"メヂカルビュー社、東京. (2000)