新規膵β細胞特異的遺伝子(BRG1)の構造と機能に関する研究

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671131
• Research Institution: OITA MEDICAL UNIVERISTY
• Principal Investigator: 浜口 和之 大分医科大学, 医学部, 講師 (60180931)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉松 博信 大分医科大学, 医学部, 助教授 (00166993) ; 若菜 茂晴 理化学研究所, ゲノム科学総合研究センター, 研究員 (90192434) ; 伊奈 啓輔 大分医科大学, 医学部, 助教授 (20203193)
• Keywords: マウス / 膵β細胞 / Differential display / MIN6 / スピードコンジェニック / NODマウス / cDNA

Research Abstract

膵β細胞において高発現を示し、グルコースに応答性を示す新規遺伝子、BRG1の構造と機能を解明するのが本研究の目的である。これまでの検討により、以下のことが判明した。
1)BRG1は、マウス膵β細胞やラット膵島で高発現しており、グルゴースに応答して発現の増強する遺伝子である。しかし、感度の高いノーザンブロットによる詳細な解析では、発現はマウスのいろいろな組織で発現されていた。マウス組織での発現は、特に睾丸において高かった。
2)BRG1遺伝子は、約14kbの遺伝子で、BRG1蛋白は約4,400個のアミノ酸から成る。塩基配列データベースからBRG1遺伝子の機能を推定した。アミノ酸は線虫からヒトまで、特にC末端側の半分は動物の種を越えて保存されていた。N末端側から、DNA結合蛋白を示唆するZnフィンガーモチーフ、ATP/GTP結合、インスリン受容体によるリン酸化部位、Tubファミリー(肥満糖尿病マウスTubby関連)、核局在化シグナルといった配列がみられた。また、本研究年度中に、線虫におけるBRG1ホモログの断片についての報告がなされ、カルモジュリン結合蛋白の1つである可能性が報告された。このような構造予測から、BRG1は細胞内においてCaイオンのセカンドメッセンジャーであるカルモジュリンに結合活性を示す蛋白であると考えられる。
3)BRG1はマウス第4染色体の糖尿病感受性遺伝子Idd11に非常に近い領域にマップされた。
4)BRG1の抗原として適当な領域よりペプチドを合成し、家兎に免疫してポリクローナル抗体を作製した。ELISAでは、非常にHigh titerの抗体が得られた。

Research Products

• [Publications] 浜口和之, 他: "肥満の疫学"肝胆膵. 42. 9-18 (2001)
• [Publications] 浜口和之, 他: "脳機能からみた肥満の病態"医学のあゆみ. 198. 1081-1086 (2001)
• [Publications] Katsuragi I, et al.: "Transplantation of normal islets into the portal vein of Otsuka Long Evans Tokushima Fatty rats prevents diabetic progression"Exp Biol Med. 226. 681-685 (2001)
• [Publications] Ikebe T, et al.: "The three-dimensional architecture of retinal blood vessels in KK mice, with special reference to the smooth muscle cells and pericytes"J Electron Microsc. 50. 125-132 (2001)
• [Publications] Liu Z, et al.: "Analysis of gap junction formation in rat hepatocytes by intravenous injection of an anti-connexin32 monoclonal antibody(HAM8)"Anat Rec. 262. 147-152 (2001)