乳癌のホルモン依存性に関連したエストロゲンレセプターの転写共役因子の解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671176
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 岩瀬 弘敬 名古屋市立大学, 医学部, 講師 (40211065)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 遠山 竜也 名古屋市立大学, 医学部, 助手 (30315882)
• Keywords: 乳癌 / ホルモン依存性 / エストロゲンレセプター / 転写共役因子 / AIB1

Research Abstract

各転写共役因子(SRC-1,TIF2,AIB1,p300/CBP,NCoR)のmRNA発現をRT-PCRによる半定量で評価中である。また、AIB1についてはDNA増幅についても検討した。また、乳癌細胞における各転写共役因子発現も検討中である。
1)正常乳腺組織、乳癌組織からのRNA抽出
当科で切除された乳癌組織、正常乳腺組織からGuanidium/cesium cloride超遠心法によりRNAを抽出する。現在RNAは約100例の蓄積がある。
2)乳癌細胞株における転写共役因子の関わり
estrogen依存性・非依存性の主な乳癌培養細胞株(MCF-7,T-47DおよびBT-20,BT-474,MDA-MB231,など)にestrogen agonist,antagonistを作用させ,RNAを抽出し、各転写共役因子の発現と、それぞれの細胞のホルモン依存性増殖との関係が検討中である。
3)ERα陽性の乳癌におけるAIB1増幅の検討
AIB1遺伝子からSouthern blot用のprobeを作成した。乳癌臨床例では124例中明らかなSouthern blotによる遺伝子増幅が認められた症例は2例にすぎず、乳癌組織内のAIB1増幅は臨床的重要性は低いと思われた。
4)RT-RCR法、Northern blot法による各転写共役因子の定量的検討
各転写共役因子のcDNA sequenceよりPCRに適当なprimerを設定し、抽出したRNAを用いてRT-PCR法によりmRNA levelでの発現を検討する。各組織での各転写共役因子発現を定量化している。