1999 Fiscal Year Annual Research Report
ヒト胸腺でのT細胞選択におけるアポトーシスの分子機構
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11671334
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
斉藤 雄史 名古屋市立大学, 医学部, 助手 (80281260)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤井 義敬 名古屋市立大学, 医学部, 教授 (40156831)
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| Keywords | caspase / bcl-2 / bcl-x / bax / bak / bim |
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| Research Abstract |
胸腺でのアポトーシスにおけるcaspaseの役割の解析
抗ヒトcaspase-3抗体を用いてFACSにてcaspase-3の発現を調べた。胸腺細胞を培養液のみで4℃と37℃で24時間培養した場合、caspase-3の発現は認められなかった。一方dexamethazone10μMを加えて24時間培養した場合とetoposide10μMを加えて24時間培養した場合、胸腺細胞のすべての分画(CD4-CD8-,CD4+CD8+,CD4+CD8-,CD4-CD8+)で、caspase-3の発現を認めた。
しかしCPP32/caspase-3 colorimetric assayではdexamethazone、etoposideを加えてもcaspase-3のupregulationは認めなかった。Annexin Vの発現はdexamethazoneやetoposideで刺激後6時間で認められている。
胸腺でのアポトーシスにおけるbcl-2 familyの役割の解析
胸腺におけるbcl-2、bax、bcl-x、bak、bimの発現をFACSにて調べた。
CD4+CD8+の分画ではbcl-2はlow、bcl-xはhigh、baxはlow、bakはlow、bimはlowであった。CD4+CD8-の分画ではbcl-2はhigh、bcl-xはlow、baxはhigh、bakはlow、bimはhighであった。CD4-CD8+の分画ではbcl-2はhigh、bcl-xはhigh、baxはhigh、bakはlow、bimはhighであった。
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