2000 Fiscal Year Annual Research Report
磁性体カチオニックリポソームによる骨肉腫に対するターゲティング遺伝子治療
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11671435
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
杉田 孝 広島大学, 医学部, 助教授 (40235883)
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| Keywords | 遺伝子治療 / 局所ターゲティング / 磁性体カチオニックリポソーム / P53遺伝子 / 骨肉腫 |
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| Research Abstract |
われわれが考案した磁性体リポソームは,効果的な局所ターゲティングが可能であり,可移植性ハムスター骨肉腫に対し,著明な抗腫瘍効果があることを証明してきた.一方、われわれはこの磁性体リポソームを遺伝子治療のための遺伝子導入ベクターとして応用を検討している.現在,1)磁性体カチオニックリポソームの作製と2)in vitroにおける遺伝子導入を行っている。
1)Egg phosphatidylcholineとCholesterolにカチオン性物質Stearylamineを,モル比4:4:1で加えたリポソーム膜内包に,強磁性体である酸化鉄微粒子を逆相蒸発法により封入し,磁性体カチオニックリポソームを作製した。
2)遺伝子導入を確認するレポーター遺伝子として,βガラクトシダーゼ遺伝子を用いた。磁性体カチオニックリポソーム(正電荷)にβガラクトシダーゼ遺伝子(負電荷)を重量比1:1で混和し、電荷により結合したβガラクトシダーゼ遺伝子・磁性体カチオニックリポソーム複合体を作製した。これを培養ハムスター骨肉腫細胞に加え24時間培養後,ウエスタンブロット法でβガラクトシダーゼ蛋白の定量を試みたが,明らかな蛋白の発現はみられなかった。
今後,リポソーム成分等に改良を加え,遺伝子導入効率のよい磁性体カチオニックリポソームを作製する.ハムスター骨肉腫p53遺伝子をダイレクトシークエンスし,遺伝子変異を確認する.本システムを用いて,ハムスター骨肉腫に野生型p53遺伝子を導入し,抗腫瘍効果について検討する予定である。
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[Publications] Kubo Tadahiko: "Targeted delivery of anticancer drugs with magnetic liposomes by intravenous administration in osteosarcoma-bearing hamsters."International Journal of Oncology. 17. 309-315 (2000)
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[Publications] Kubo Tadahiko: "Targeted systemic chemotherapy using magnetic liposomes containing Adriamycin for osteosarcoma in hamsters."International Journal of Oncology. 18. 121-125 (2001)
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[Publications] Kubo Tadahiko: "Anti-tumour effect on hamster osteosarcoma by new chemotherapeutic system with magnetic liposomes."BOA/JOA Combined Congress 2000. 31 (2000)
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[Publications] Kubo Tadahiko: "Novel design of liposomes including anticancer agent for magnetic targeting."The 3rd Meeting of the Asia Pacific Musculoskeletal Tumor Society. 122 (2000)
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[Publications] 久保忠彦: "ハムスター骨肉腫に対する静脈内投与による制癌剤封入磁性体リポソームの抗腫瘍効果."Drug Delivery System. 15・4. 343 (2000)
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[Publications] 久保忠彦: "磁気ターゲティングを応用した新しい化学療法システム-抗腫瘍効果に関する検討."日本整形外科学会雑誌. 74・8. 1427 (2000)
