骨肉種肺転移を規定する機能的CD44-アンチセンスCD44による治療

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671467
• Research Institution: Kurume University
• Principal Investigator: 成田 修吾 久留米大学, 医学部, 助手 (10237604)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 善明 美千久 久留米大学, 医学部, 助手 (10289465) ; 平岡 弘二 久留米大学, 医学部, 助手 (10268914) ; 小宮 節郎 鹿児島大学, 医学部, 教授 (30178371)
• Keywords: CD44 / 骨肉腫細胞 / 細胞運動性 / 転移

Research Abstract

CD44はヒアルロン酸のレセプターであり、癌転移に関与する分子として注目されている。ヒアルロン酸は軟骨組織、滑膜、骨や関節液中に存在する酸性ムコ多糖体であり、腫瘍細胞がfibroblastを刺激しヒアルロン酸の産生を亢進させるとの報告もある。我々は骨肉腫培養細胞を用い、その細胞表面にCD44が発現しているかをを確認し、ヒアルロン酸により細胞活動性が変化するかを検討した。培養骨肉腫細胞にはCD44が高率に存在していることをFlow cytometerを用いた検索で証明した。また異るexonが含まれたprimerを作成しRT-PCRを行った結果mutationの存在も考えられた。MG63細胞を使用しヒアルロン酸を混濁した培養液で培養しCD44の発現性をFlow cytometerで確認した。すると分子量30万、1%においてピークに変化が認められた。これはCD44にヒアルロン酸が結合し抗体数が減少したものと考えられた。従って骨肉腫細胞のCD44はヒアルロン酸のligandとして機能していることが推察された。pore size 8μmのトランスウエル・チャンバーを使用しヒアルロン酸の希釈配列を作成しMG63でchemotaxisについて検討した。5%、0.01%のヒアルロン酸濃度で膜の透過性が亢進した。このことよりヒアルロン酸によって骨肉腫が運動性を向上する可能性が示唆され、骨肉腫細胞においてCD44が発現していることは腫瘍細胞がヒアルロン酸により転移性の獲得に良い条件を自ら作り出している可能性があると考えられた。