ヒト前立腺におけるステロイドホルモン代謝型P450に関する研究-標的臓器におけるアンドロゲン代謝の役割-

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671575
• Research Institution: Osaka City University Medical School
• Principal Investigator: 川嶋 秀紀 大阪市立大学, 医学部, 助手 (70234060)
• Keywords: CYP3A5 / human prostate / unique 5'-untranslated sequence / protein expression / purification / 6β-hydroxylation / testosterone / progesterone

Research Abstract

本研究では、ヒト前立腺ライブラリーよりステロイドホルモン代謝型P-450の一つであるCYP3A5のcDNAを単離した。前立腺のCYP3A5のcDNAはユニークな5'-非翻訳領域を持っており肝臓と異なる転写調節を受けている事が示唆された。更にヒトゲノムのBACライブラリーをCYP3A5のcDNAをプローブとしてスクリーニングしたところ5個の陽性クローンが得られた。それらをサザン解析したところ特異的な5'-非翻訳領域がそのうちの2個のクローンに含まれている事が示された。またこの遺伝子を大腸菌内で発現させた後Ni-NTAカラムを用いてspecific contentが4.4nmol/min/nmolP450まで精製した。この精製蛋白はテストステロン及びプロゲステロンの6β-水酸化活性を有していたがDHTに対する活性は認められなかった。テストステロン及びプロゲステロンの6β-水酸化活性反応のKm値は各々143μMと114μMで比較的低い価である事も示された。

Research Products

• [Publications] Yamakoshi,Y.,Kishimoto,T.,Sugimura,K.& Kawashima,H.: "Human prostate CYP3A5 : Identification of a unique 5'-untranslated sequence & characterization of purified recombinant protein."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 260. 676-681 (1999)