癌関連抗原MN/CA9を標的とした腎細胞癌特異的免疫療法の検討

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671576
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 植村 天受 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (90213397)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉川 和宏 愛知医科大学, 医学部, 講師 (60109759) ; 大園 誠一郎 奈良県立医科大学, 医学部, 助教授 (00183228) ; 趙 順規 奈良県立医科大学, 医学部, 助手 (90285362)
• Keywords: 腎細胞癌 / 特異的免疫療法 / MN / CA9

Research Abstract

われわれはこれまでに、MN抗原を標的とした特異的癌免疫療法をめざし、MN強制発現マウス腎癌モデルの作製、MN特異的抗体の作製およびスクリーニングを行ってきた。今年度は、MHC Class-I(HLA-A24およびH-2K^d)拘束性のMN抗原ペプチドを合成し、腎癌に対する特異的免疫療法、すなわち癌ワクチン療法の有用性について、in vitroおよびin vivo実験モデルを用いて検討した。はじめに、BALB/c由来マウスRCC細胞RenCaおよびembryofibroblast細胞BALB3T3にMN/CA9遺伝子導入し、MN抗原を発現したMN-RenCaおよびMN-3T3細胞を確立した。これらの細胞を用いて、CTL precursorの誘導能を検討した。方法は、抗原ペプチド100μg/IFAをBALB/cマウス皮下に4回免疫し、脾細胞を採取培養しTNF assayおよびLDH release assayにてCTL活性について検討した。次に同様に免疫したマウスおよびコントロールマウスの皮下にMN-RenCaを移植し、経時的に腫瘍サイズを測定し抗原ペプチドによる免疫効果(抗腫瘍効果)について検討した。また、MN-RenCa細胞パルスで得られたCTL(CD8+)をnaiveマウスに細胞移入し、同様に抗腫瘍効果について検討した。結果はMN抗原ペプチドの免疫によりMN抗原特異的なCTL precursorが誘導された。次に、このCTL細胞10^7個をMN-RenCa皮下注後のヌードマウスに細胞移入したところ腫瘍生着率がコントロールの100%に比較し著明に低値であった。またBALB/cマウスへの抗原ペプチド療法においても、移植4週後の腫瘍重量はコントロールに比較して著明に小さく、腎細胞癌においてMN抗原ペプチドを用いた特異的癌免疫療法の有用性が示唆された。

Research Products

• [Publications] 植村天受: "腎細胞癌の新しいバイオマーカーMN/CA9"臨床泌尿器科. 55(5)(in press). (2001)
• [Publications] Cho M: "Activation of MN/CA9 gene in associated with hypomethylation in human renal cell carcinoma cell lines"Moleculan Cacinogenesis. 27(3). 184-189 (2001)
• [Publications] 植村天受: "MN/CA1Xを標的抗原とした腎細胞癌特異的免疫療法"Biotherapy. 14(5). 487-489 (2000)
• [Publications] Uemura H: "Expression of MN antigen in Urologic cancer : potentiaal tools as a therapentic target"Aktuel Urology. 31(9). 52-54 (2000)
• [Publications] 植村天受: "腎細胞癌標的抗原MN/CA1Xの臨床的意義"泌尿紀要. 46(10). 745-748 (2000)
• [Publications] Uemura H: "MN/CA1X/G250 as a potential target for immunotherapy of renal cell carcinomas"British J.Cancer. 81(4). 741-746 (1999)