2001 Fiscal Year Annual Research Report
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11671579
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
頴川 晋 北里大学, 医学部, 講師 (60160347)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
馬場 志郎 北里大学, 医学部, 教授 (00051889)
岩村 正嗣 北里大学, 医学部, 講師 (20176564)
内田 豊昭 北里大学, 医学部, 講師 (70146489)
高垣 洋太郎 北里大学, 医学部, 教授 (50281324)
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| Keywords | 前立腺癌 / 癌特異遺伝子 / クローニング |
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| Research Abstract |
我々は新規発現遺伝子を見つけだすために人の前立腺癌組織よりAcid-Guanidinium-Thiocyanate-Phenol-Chloroform(AGPC)法によってtotal RNAを抽出し、異なる条件下の細胞で発現しているpoly(A)tailを持つmRNAの差異を見つけるためにDifferetial Display(DD)法を行い、次に蛍光イメージアナライザーにて解析、300pb以上の癌特異的で差異の強いバンド96個を切り出した。これらをさらに分離、精製してその内の18サンプルを、pGEM-T Easy VectorにTA-Cloningし、ゲノムDNAシークエンスより得られた結果をジーンバンクのデータと比較、検索を行った。シークエンスより得られた遺伝子配列よりプローブを設計し、我々が作成したcDNAライブラリーのオリゴヌクレオチドプローブを用いたハイブリダイゼーションによるスクリーニングも行った。遺伝子のクローニングをしたうちの1サンプルが、Human Lactoferin mRNA(Accession No. M93150)2360bpの3端末に近い361bpと同一であることが確認された。また、他の臨床検体に対するLacfoferinの発現の有無を確認するため、ノーザンハイブリダイゼーションおよびRT-PCRを行った。この結果、正常組織においての同遺伝子の発現は、骨格筋、胸腺、脾臓、肝臓、肺、骨髄、乳腺、前立腺、胃、気管に見られた。RT-PCR解析では、前立腺癌10例中5例に発現が認められた。前立腺癌でのLactoferin発現には個体差がありLactoferin発現は一様ではないことが示唆された。現在、臨床情報と対照して意義を検討中である。
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[Publications] Egawa S, Shimura S, et al.: "Toxicity and health-related quality of life during and after high dose rate brachytherapy foliowed by external beam radiotherapy for prostate cancer"Jpn J Clin oncol. 31. 541-547 (2001)
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[Publications] Irie A, Egawa S: "Recent advances in gene therapy for bladder cancer"Res. Adv. Cancer. 1. 139-148 (2002)
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[Publications] Egawa S, et al.: "Use of pretreatment prostate specific antigen doubling time to Predict outcome after radical prostatectomy"Prostate Cancer and Prostatic Diseases. 9. 269-274 (2000)
