抗癌遺伝子リボザイムとp53同時発現アデノウイルスベクターの抗腫瘍効果の検討

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671580
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 入江 啓 北里大学, 医学部, 助手 (50193694)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 頴川 晋 北里大学, 医学部, 講師 (60160347) ; 岩村 正嗣 北里大学, 医学部, 講師 (20176564) ; 内田 豊昭 北里大学, 医学部, 講師 (70146489) ; 宋 成浩 北里大学, 医学部, 助手 (30206669)
• Keywords: 悪性新生物 / 遺伝子治療 / アデノウイルス / 癌遺伝子 / 腫瘍抑制遺伝子 / リボザイム

Research Abstract

数種の治療的遺伝子発現アデノウイルスベクターの,高力価精製バイアルの作製および力価測定は終了した.すなわち,抗癌遺伝子リボザイム(抗Hras,および抗erbB2リボザイム)発現ベクター,p53発現ベクター,およびこれらを同時(抗Hrasリボザイム+p53,抗erbB2リボザイム+p53).に発現するベクターを作成後,増殖-精製を行い,力価測定により高い感染性を有するウイルスベクターが得られた.作製したウイルスベクターの,各種腫瘍細胞への感染効率を確認する目的で,2種のヒト膀胱腫瘍細胞株(EJ,T24)および4種のヒト前立腺癌細胞株(LNCap,PC-3,TSU,DU-145)に対して,beta-galactosidaseを発現するウイルスベクターを培養細胞に感染させて検討した.これらより得られた,作製した各ウイルスベクターの力価の相違,および各腫瘍細胞への感染効率の相違をもとに,各腫瘍細胞に対するウイルスベクターの力価を標準化し,腫瘍細胞の増殖抑制効果の検討を開始している.それぞれの治療的遺伝子を単独で使用したときに,腫瘍増殖抑制効果が容量依存的に認められることが確認できた.また,複数のウイルスベクターの併用効果,あるいは同時発現ベクターの腫瘍抑制効果につき検討している.現在,標的遺伝子およびその生成蛋白の治療前後における発現性の変化につき,分子生物学的解析を行っている.今後は,標的遺伝子だけでなく,腫瘍増殖関連遺伝子(アポトーシス因子,血管新生因子など)の変化についても,免疫染色および分子生物学的手法により解析していく予定である.

Research Products

• [Publications] Akira Irie: "Therapeutic afficacy of an adenovirus-medianted anti-H-ras ribozyme in experimantal bladder cacner"Antisense Nucleic Acid Drug Dev.. 9(4). 341-349 (1999)
• [Publications] Toshiya Suzuki: "Adenovirus-mediated ribozyme targeting of HER-2/neu inhibits in vivo growth of breast cancer cells Gene Ther."(in press 2000).