黄体の寿命延長における黄体内の活性酸素消去酵素の役割:特にsuperoxide dismutaseの役割について

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671623
• Research Institution: Yamaguchi University
• Principal Investigator: 杉野 法広 山口大学, 医学部, 助手 (10263782)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中村 康彦 山口大学, 医学部・附属病院, 助教授 (30227946)
• Keywords: 黄体 / SOD / 活性酸素 / アポトーシス / 寿命

Research Abstract

1.黄体内のSODの低下がprogesterone分泌に影響するかを検討した。細胞内Cu,Zn-SOD活性を低下させる目的で、ラットCu,Zn-SOD antisense oligonucleotideを黄体細胞浮遊液に添加し、hCGの存在下に48時間培養後、黄体細胞中のCu,Zn-SOD活性と培養液中のprogesterone濃度を測定し、さらにhoechst dyeによる核染色によりapoptosis細胞の割合を検討した。antisense(10μM)の添加によりCu,Zn-SOD活性とprogesterone分泌は有意に抑制された。尚、apoptosis細胞の割合には、有意の変化はみられなかった。このantisenseによるprogesterone分泌抑制作用が活性酸素を介したものかどうかを検討するため、antisenseと同時に抗酸化剤であるN-acetyl-L-cycteineを添加したところ、antisenseのprogesterone分泌抑制作用は完全にブロックされた。すなわち黄体細胞中のCu,Zn-SODの低下は活性酸素を介しprogesterone分泌を抑制することが明らかとなった。2.胎盤性黄体刺激ホルモンが黄体をレスキューしその機能を延長させると共に黄体内のSOD発現を増加させるかを検討した。偽妊娠ラットの9日目から胎盤性黄体刺激ホルモンとして、妊娠12日目の胎盤を24時間培養して得られた胎盤培養上清を12日目まで腹腔内投与し、12日目の血中Progesterone値、黄体内-SODの活性とmRNAレベルを測定した。胎盤性黄体刺激ホルモンの投与は黄体内のSOD発現及び血中progesterone値を有意に増加させた。以上のことから、妊娠に伴う黄体機能の延長には、胎盤性黄体刺激ホルモンによる黄体内のSODの増加が関与していることが考えられた。

Research Products

• [Publications] Sugino N.: "Suppression of intracellular superoxide dismutase activity by antisense oligonucleotides causes inhibition of progesterone production by rat luteal cells"Biology of Reproduction. 61. 1133-1138 (1999)
• [Publications] Sugino N.: "Superoxide dismutase expression in the human capus luteum during the menstrual cycle and in early pregnancy"Molecular Human Reproduction. 6(in press). (2000)
• [Publications] Sugino N.: "Induction of superoxide dismutase by decidualization in human endometrial stromal cells"Molecular Human Reproduction. 6(in press). (2000)
• [Publications] Takiguchi S.: "Rescue of the corpus luteum and an increase in luteal superoxide dismutase expression induced by placental luteotropins in the rat : action of cestosteronre without conversion to estrogen"Biology of Reproduction. 62(in press). (2000)