1999 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
11671651
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Research Institution | Keio University |
Principal Investigator |
塚崎 克己 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (40118972)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹原 京子 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10286536)
山下 博 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40276332)
久布白 兼行 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (50170022)
岩田 卓 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30296652)
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Keywords | 子宮体癌 / β1,4ガラクトース転移酵素 / 糖鎖遺伝子 / 転移 / 遺伝子導入 |
Research Abstract |
本年度は婦人科癌のなかで子宮体癌(以下体癌と略す)における糖鎖遺伝子に関する検討を行い、ガラクトース転移酵素について以下の研究成果が得られた。 l.β1,3ガラクトース転移酵素(β1,3GT)とβ1,4ガラクトース転移酵素(β1,4GT)の発現 1型糖鎖の合成を規定するβ1,3GTの酵素活性の測定系を申請者らが作成したヒト型モノクローナル抗体HMST-1を用いた薄層クロマトグラフィー免疫染色法を用いて確立した。また、2型糖鎖の合成を規定するβ1,4GTの酵素活性の測定系をモノクローナル抗本H11を用いたELISA法にて確立した。本測定系にて培養細胞および正常組織、癌組織のGT活性を測定した結果、体癌におけるβ1,3GT活性はβ1,4GT活性に比べ高値を示した。また、子官頸癌や卵巣癌ではβ1,3GT活性はβ1,4GT活性に比べ低値であった。さらに、ノーザンブロット法にて体癌由来株では頸癌株や卵巣癌株に比べβ1,4GTmRNAの発現は低下していることを明らかにした。以上より婦人科癌における1型糖鎖や2型糖鎖の発現にはβ1,3GTおよびβ1,4GTが関与していることが示された。 2.β1,4GT遺伝子の発現と細胞特性の関連 子宮体癌由来株細胞SNG-Mにβ1,4GT遺伝子のセンスcDNAあるいはアンチセンスcDNAを導入し、GT高発現株およびGT低発現株を作成した。そして、β1,4GTの高発現株およびβ1,4GTの低発現株のin vitroにおける細胞特性を解析した。その結果、β1,4GT高発現株は細胞の増殖能や細胞外基質への接着能が亢進したのに対し、β1,4GT低発現株は増殖能・接着能は低下した。従ってβ1,4GT遣伝子の発現は体癌細胞の増殖能や接着能に関与している可能性が示唆された。
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[Publications] Koji Kobiki, Katsumi Tsukazaki,et al.: "Detection if endometrial cancer by flow cytometry using two monoclonal antibodies"Cytometry. 36. 150-156 (1999)
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[Publications] Takuya Irie,Katsumi Tsukazaki ,et al.: "Inhibition Attachment and Chemotactic Invasion of Uterine Endometrial Cancer Cells by a New Vinca Alkaloid, Conophylline"Anticancer Research. 19. 3061-3066 (1999)
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[Publications] 久布白兼行、塚崎克己 他: "妊娠時の子宮頸部初期癌と円錐切除術"産婦人科治療. 78(6). 1097-1103 (1999)