直腸肛門奇形マウスにおける器官形成過程の分子生物学的研究及びその治療法の開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671774
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 常盤 和明 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (30163968)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岩井 直躬 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (90128695)
• Keywords: 直腸肛門奇形 / 実験モデル / 病態発生 / 細胞動態 / 分子生物学

Research Abstract

直腸肛門奇形の発生過程を検討するために,モデルマウス胎仔を用いた実験的研究を行った。すなわち,C57BL/6マウスを交配後、妊娠マウスに妊娠9日目にEtretnate 60mg/kgを含むゴマ油を経口投与し,それぞれ妊娠9.5日目,10日目,11日目,12日目,13日目に胎仔を取り出した。妊娠マウスに妊娠9日目にゴマ油のみを投与した群を対照群とし、Etretinste投与群と同様に胎仔を取り出した.取り出した胎仔を直ちにZamboni液で固定したあとパラフィン包埋し,正中矢状断の4μm切片を作成した。それぞれの胎生日における標本を用いて、細胞増殖については抗PCNA抗体を用いた免疫組織化学染色、細胞死(programmed cell death)についてはTUNEL法を用いた組織学的検討を行った.
胎生9.5日目,10日目,13日目の胎仔の細胞増殖と細胞死の比較では,Etretinate投与群と対照群の間に明らかな相違は認められなかった.胎生11日目において,対照群では総排泄腔膜から臍にかけて著明な細胞増殖が認められ,Etretinate投与群では背部から尾部にかけて著明な細胞死が認められた.胎生12日目では,対照群では肛門の形成される部分で細胞死が認められたのに対し,Etretinate投与群では明らかな細胞死は認められなかった.総排泄腔の形成に関係する中胚葉系の細胞は背尾部の細胞群に由来すると考えられており,これらの結果を踏まえると、Etretinate投与群では背尾部の中胚葉系の細胞に何らかの異常をきたし,それが直腸肛門奇形の発生に関与している可能性があることを示唆していると思われた.また,脊髄系の異常発生との関連性も示唆された.

Research Products

• [Publications] Imazu M: "Factors of bilsary carcinogenesis in chsledochsl cycts"European Journal of Pediatric Surgery. 11. 24-27 (2001)
• [Publications] Tomiyama H: "Relationship between the type of RET/GDNF/NTN or SOX/O gene mutations and long-tern results after for total colonic aganglionosis with small howel involvement"European Journal of Pediatric Surgery. 36. 1685-1688 (2001)
• [Publications] Ono S: "A bleeding tendency as first symptom of a cheledochal cyst"Pedoatroc Surgery International. 16. 111-112 (2000)
• [Publications] Yamagami T: "Intrahepatic portosystemic venous shunt associated with biliary atresia"Pedoatroc Radiolosy. 30. 489-491 (2000)
• [Publications] Go S: "Arterio venous malformation of the penis in an infant"Journal of Pediatric Surgery. 35. 1130-1131 (2000)