第7番染色体に存在すると推測される口腔癌増殖抑制遺伝子のクローニング

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671976
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 鵜澤 一弘 千葉大学, 医学部, 助教授 (30302558)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 白澤 浩 千葉大学, 医学部, 教授 (00216194) ; 鈴木 信夫 千葉大学, 医学部, 教授 (90111426) ; 丹沢 秀樹 千葉大学, 医学部, 教授 (50236775) ; 渡辺 俊英 千葉大学, 医学部, 助手 (10301095)
• Keywords: 染色体7q31.1-31.2 / LOH / RDA法 / differential display法

Research Abstract

染色体7q31.1-31.2領域にLOHが検出された同一患者の腫瘍組織と正常組織から抽出・精製したDNAとRNAを用いて以下の実験を行った。
1)正常組織と腫瘍組織のRNAを用いて、differential dysplay法を行い、腫瘍組織にはないが正常組織にあるmRNAのcDNAを12種類得たが、いずれもFluorescence in situ hybridization法(FISH法)で7番染色体由来であることを確認できなかった。
2)別の患者のサンプルでdifferential dysplay法を行い、腫瘍組織にはないが正常組織にあるmRNAのcDNAを3種類得た。このうち、1種類がFluorescence in situ hybridization法(FISH法)で7番染色体由来であることが確認できた。
3)正常組織と腫瘍組織のDNAを用いて、Representative difference analysis法(RDA法)を行い、腫瘍組織にはないが正常組織にあるDNA断片を2種類得た。
4)2)で得られたcDNAと3)で得られたDNA断片をhybridizeしたところ、相同性を有するDNA断片が1種類得られた。
5)このDNAを用いて、腫瘍組織と正常組織での発現の有無と、genomic DNA上での存在の有無の確認とsequenceを行っているところである。