口腔癌の浸潤増殖能の解析と治療に関する実験的研究-MMP産生を標的とした腫瘍の抑制効果について-

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11671987
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 西山 明慶 岡山大学, 歯学部, 助手 (50189320)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐々木 朗 岡山大学, 歯学部・附属病院, 講師 (00170663)
• Keywords: MMP / 口腔癌 / MMP阻害剤 / 同所移植 / 転移

Research Abstract

1.in vitroにおける口腔扁平上皮癌細胞株のMMP産生および浸潤能についての解析
1)当科において樹立された口腔扁平上皮癌株NOL-1,N0L2-2,FZK、細胞開発銀行(理化学研究所)より供与された口腔扁平上皮癌株HSC-2,3,4,HO-1-u-1,HO-1-N-1,について培養上清中へのMMP産生を検定した。いづれの細胞においてもMMP-2もしくはMMP-9の産生が確認されたが,その発現様式については細胞間で多少異なっていた。
2)上記細胞のうち活性型MMP-2およびMMP-9をともに良く発現している事が確認されたHSC-3を用いてコラーゲンゲルを用いたラフトカルチャーinvasion assayによりin vitroにおけるMMP阻害剤(MMI-166)の腫瘍浸潤抑制効果を検討した。
HSC-3は強い浸潤能を認めたが,MMI-166投与群において濃度依存性に浸潤が抑制された。100μMの濃度で,ほぼ浸潤が阻止され,MMP阻害によりin vitroの腫瘍浸潤が抑制されることが確認された。
2.ヒト口腔扁平上皮癌のヌードマウス同所移植モデルを作製し,MMP阻害剤の腫瘍浸潤増殖抑制効果の検討.
1)口腔扁平上皮癌同所移植による浸潤モデルの作製:
上記1.-1)2)の結果からMMP産生と浸潤能の因果関係が明らかと思われるHSC-3を用いてを口腔扁平上皮癌同所移植モデルを作製した.
培養細胞浮遊液(5x10^6個)を4週齢のBalb/C系ヌードマウスの舌に注入したところ,95%以上の確率で腫瘍の形成を認め,高分化型の扁平上皮癌の組織像を示した。さらに腫瘍辺縁において辺縁形態の乱れ,腫瘍小胞巣の散在,血管内浸潤など局所浸潤能の指標となる組織像をみとめ,悪性腫瘍の局所浸潤モデルとして適当であると考えられた。
2)MMI-166経口投与により腫瘍増大抑制が認められた。