2000 Fiscal Year Annual Research Report
透過性細胞を用いた胃壁細胞内プロトンポンプ輸送系の制御機構の解明
| Project/Area Number |
11672160
|
|---|
| Research Institution | Laboratory of Pharmacology and Toxicology, Graduate School of Pharmaceutical Sciences, The University of Tokyo |
|---|
Principal Investigator |
漆谷 徹郎 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助教授 (40262159)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
長尾 拓 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (30217971)
|
|---|
| Keywords | 胃酸分泌 / 胃底腺 / βエシン / ジギトニン / phosphatidylinositol transfer protein |
|---|
| Research Abstract |
本研究の目的は,2種類の透過性胃底腺モデルを用いて,壁細胞内シグナル伝達を解明することであった.それぞれについて,以下の成果を得ることが出来た.
(1)まずβエシン透過性胃底腺を用いてcAMPの下流にどの様なタンパクが関係しているのか各種タンパクキナーゼの抑制ペプチド,各種小分子Gタンパク質の機能ドメインを用いて検討したところ,A-キナーゼ,及びその下流にミオシン軽鎖キナーゼ様の酵素が関与している可能性を示した.その他のキナーゼの関与は見出されなかった.各種小分子Gタンパク質のうち,効果が得られたのはArfのみであった.βエシン透過性胃底腺の酸分泌のGTPγSによる抑制時に膜にArfが蓄積することから,小胞輸送にArfが関与する可能性を示した.これはAm.J.Physiol.に論文として報告した.
(2)ジギトニン透過性胃底腺でスクリーニングすることによって細胞質由来の未知の活性化・抑制因子を,各種クロマトグラフィーによって分画・精製し,それぞれの因子を同定することを目指した.活性化因子として,高分子と低分子の2種類をみいだし,高分子の方はphosphatidylinositol transfer protein輸送蛋白であることを明らかにした.抑制因子は,複数のサブユニットから成る高分子複合体を形成しているらしく,構造決定には至っていないが,胃底腺刺激によりサイトゾル中の抑制因子が増加することが認められ,胃酸分泌活性化の一段階として,膜分画から抑制因子がはずれるという新規の機序を提唱することが出来た.この成果は,現在2報の論文として投稿中であり,一方はAm.J.Physiol.に受理された.
|
Research Products
(6 results)
-
[Publications] K.Akagi,T.Nagao,& T.Urushidani.: "Responsiveness of β-escin-permeabilized rabbit gastric gland model-Effects of functional peptide fragments."Am.J.Physiol.. 277. G736-G745 (1999)
-
[Publications] Y.Sugita,T.Nagao,& T.Urushidani.: "Nonspecific effects of the pharmacological probes commonly used to analyze signa transduction in rabbit parietal cells."Eur.J.Pharmacol.. 365. 77-89 (1999)
-
[Publications] K.Nishioka,T.Nagao,& T.Urushidani.: "Correlation between acid secretioin and proton pump activity during inhibition by proton pump inhibitors omeprazole and pantoprazole."Biochem.Pharmacol.. 58. 1349-1359 (1999)
-
[Publications] T.Nishizawa,T.Nagao,T.Iwatsubo,J.G.Forte,& T.Urushidani.: "Molecular Cloning and Characterization of a Novel CLIC-related Protein, Parchorin, Expressed in Water-Secreting Cells."J.Biol.Chem.. 275. 11164-11173 (2000)
-
[Publications] Y.Muto,T.Nagao,M.Yamada,K.Mikoshiba,& T.Urushidani.: "Role of F-actin in carbachol-stimulated acid secretion and intracellular Ca^<2+> release in rabbit parietal cell."Am.J.Physiol.. 280. C255-C264 (2001)
-
[Publications] N.Omi,T.Nagao,& T.Urushidani.: "Phosphatidylinositol is an essential determinant for the K+ permeability involved in the gastric proton pumping."Am.J.Physiol.. (in press).
