2000 Fiscal Year Annual Research Report
真核生物染色体におけるトリプレットリピートの伸長機構の解明
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11672193
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| Research Institution | Meisei University |
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Principal Investigator |
清水 光弘 明星大学, 理工学部, 助教授 (80231364)
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| Keywords | トリプレットリピート / 遺伝病 / クロマチン / ヌクレオソーム / 染色体 / 酵母 / 分子生物学 / DNAの高次構造 |
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| Research Abstract |
1991年以降,ヒト遺伝病発症の分子機構の一つとしてトリプレットリピートの伸長という新たな変異が見いだされ,現在までに14種類のトリプレットリピート病が報告されている.本研究の目的は,in vivoにおけるトリプレットリピートのクロマチン構造の特徴を明らかにして,発症機構と密接に関係しているリピートの伸長機構を解明することである.これまでに,トリプレットリピートのヌクレオソーム形成はin vitro再構成によって評価されてきたが,真核生物染色体におけるリピートの構造と動態についてはほとんどわかっていない.最近,我々はポジショニングしたヌクレオソームを含む酵母ミニ染色体をベクターとして,in vivoでヌクレオソーム形成を評価できる系を構築した.この系を用いて,種々の長さの(CTG)_n (n=12,30,59,80)及び(CGG)_<12>,(GAA)_<12>をヌクレオソーム中央またはフリー領域に挿入して,in vivoでのヌクレオソーム形成に及ぼす効果を調べた.(CTG)_<12,30,59>をヌクレオソームフリーヌクレアーゼ感受性領域に挿入すると,いずれの場合もヌクレアーゼ感受性領域が消失して,その位置に新たなヌクレオソームの形成が促進された.一方,ヌクレオソーム中央領域に各CTGリピートを挿入した場合は,その長さに依存して,ミニ染色体全体におけるヌクレオソームの位置が変化したが,CTGリピートはヌクレオソームに取り込まれていた.一方,(CGG)_<12>をヌクレオソーム中央部位に挿入すると,ヌクレオソームのポジショニングが破壊された.本研究によって,in vivoにおいて,(CTG)_nはヌクレオソーム形成を促進するのに対し,(CGG)_nはヌクレオソームの形成を阻害することが示された.
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