混合培養血管モデルを用いた動脈硬化発症に対する抗酸化物質の作用評価とメカニズム

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11672208
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 野口 範子 東京大学, 先端科学技術研究センター, 助手 (40198578)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 二木 鋭雄 東京大学, 先端科学技術研究センター, 教授 (20011033)
• Keywords: 混合培養 / 動脈硬化 / 酸化 / LDL / 抗酸化物質 / サイトカイン

Research Abstract

本研究は化学的な反応性から動脈硬化の発症進展を抑制することが期待される抗酸化物質の作用を混合細胞培養により構築した血管モデルを用いて、位置特異的かつ定量的に評価することを目的としている。本年度は蛍光プローブを用いて血管モデルを構成する細胞(好中球やマクロファージ)の膜内で進行する脂質過酸化を高感度かつ選択的に定量化する方法を確立した。このプローブを変性もしくは未変性のLDLに取り込ませ、培養細胞に添加し、LDLの酸化を定量するとともに、プローブを含むLDLが細胞に取り込まれた後の細胞内の酸化を追跡することを可能にした。この手法を混合培養に適用し、抗酸化物質の作用を評価することができる。
また、動脈硬化発症の初期の起こる単球の内皮細胞への接着に対する抗酸化物質の抑制作用について検討した。酸化LDLによって惹き起される単球の接着分子の活性化に対し、α-トコフェロールは有意に抑制効果を示したが、βートコフェロールは抑制効果を示さなかった。この2種類の抗酸化物は、反応基をオルト位が水素かメチル基かの違いだけで、ラジカルとの反応性は本研究に用いた濃度では変わらない。抗酸化物質の化学構造と細胞機能発現の関係を示す興味深い結果である。今後、混合培養系において、抗酸化物質による細胞機能調節機構と抗動脈硬化作用について研究をすすめる。

Research Products

• [Publications] Hiromasa Yamashita: "Oxidation of low density lipoprotein and plasma by 15-lipoxygenase and free radicals"FEBS Lett.. 445. 287-290 (1999)
• [Publications] Honglian Shi: "Formation of phospholipid hydroperxides and its ihinibition by a-tocopherol in rat brain synaptosomes induced by peroxynitrite"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 257. 651-656 (1999)
• [Publications] Noriko Noguchi: "Action of quinolinic and indolinonic aminxyls as radical-scavenging antioxidant"Chem. Phys. Lipids. 99. 11-19 (1999)
• [Publications] Mikio Takaku: "An In Vitro Coculture Model of Transmigrant Monocytes and Foam Cell Formation"Arterioscler Thromb Vasor. Biol.. 19. 2330-2339 (1999)
• [Publications] Hiromasa Yamashita: "Oxidation of low density lipoprotein and plasma by 15-lipoxygenase and free radicails"FEBS. Lett.. 445. 287-290 (1999)
• [Publications] Honglin Shi: "Dynamics of antioxidant action of ubiquinol : a reappraisal"BioFactors. 9. 141-148 (1999)
• [Publications] Norimasa Yoshida: "Vitamin E protects against polymorphonuvlear leukocyte-dependent adhesion to endothelial cells"J. Leukocyte Biol.. 65. 757-763 (1999)
• [Publications] Akira Watanabe: "Rate constants for hydrogen atom abstraction by a-tocopheroxy radical from lipid, hydroperoxide and ascorbic acid"Chem. Lett.. 613-614 (1999)
• [Publications] Honglian Shi: "Comparative study on dynamics of antioxidative action of a-tocopheryl hydroquinone, ubiquinol, and a-tocopherol against lipid peroxidation"Free Rad. Biol. Med.. 27. 334-346 (1999)
• [Publications] Kimihiro Nishino: "Dynamics of action of bisphenol as radical-scavenging antioxidant against lipid peroxidation in solution and liposomal membranes"Free. Rad. Res.. 31. 535-548 (1999)
• [Publications] Kazuhiro Miyauchi: "Action of pyroloquinolinequinol as an antioxidant againsot lipid peroxidation in solution"Antioxidants Redox Signaling. 1. 547-554 (1999)
• [Publications] Yon. Hui. Kim: "Tnnibition of c-jun expression induces antioxidant enzymes under serum deprivation"Arch. Biochem. Biophys.. 374. 339-346 (1999)
• [Publications] Noriko Noguchi: "Antioxidants in Human Health & Disease"CAB International. 450 (1999)
• [Publications] 野口範子: "老化予防食品の開発"シーエムシー. 413 (1999)