神経因性疼痛に対するGDNF関連分子による治療法開発の基礎的研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11672282
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 鈴木 秀典 日本医科大学, 医学部, 助教授 (30221328)
• Keywords: グリア細胞株由来神経栄養因子 / 神経因性疼痛 / GFRα-1 / 慢性絞扼性障害 / 競合RT-PCR法 / RNase protection assay / 免疫組織化学 / タキキニン受容体

Research Abstract

神経因性疼痛に対するグリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)関連分子による治療法の開発の基礎研究を行い、以下の知見を得た。
1.ラットを用いて神経因性疼痛モデルを作製した。成熟ラット片側坐骨神経を緩く結紮することによって慢性絞扼性障害を惹起した。Von Frey法によって行動学的に神経因性疼痛のひとつの症状と考えられる異痛症 allodynia の発現を観察した。数日後より対照側と比べ異痛症が生じ始め、2週間後に明らかな差異を示した。
2.GDNFあるいは神経成長因子(NGF)などの栄養因子のmRNA発現変化を検討するために、RNase protection assay法を確立した。この方法で高感度に各組織のGDNFおよびNGF mRNAの測定が可能であった。
3.痛覚伝達に関与すると考えられているタキキニン受容体の変化を神経因性疼痛モデルにおいて検討するために、競合RT-PCR法を用いて定量的に高感度にタキキニン受容体を測定する方法を開発した。この方法によって脊髄のタキキニン受容体を定量したところ、神経因性疼痛モデルにおいて、障害側でsubstance Pに高親和性を持つタキキニン受容体NK-1 mRNAの発現が変化している可能性が示唆された。
4.成人ヒト骨格筋において、GDNF受容体分子の一つであるGFRα-1の発現を免疫組織化学的に検討し、GFRα-1様免疫反応が神経筋接合部および筋内有髄神経軸索にみられることがわかった。PT-PCR解析によって運動ニューロンでGFRα-1分子が産生されている可能性が示唆された。以前報告したように、GDNF様免疫反応性が筋線維、特に神経筋接合部に集積していることから、骨格筋においてGDNFが産生され、筋から分泌されたGDNFは神経筋接合部においてGFRα-1と結合することによって神経終末から取り込まれ、軸索内を輸送されると考えられた。

Research Products

• [Publications] Hase, A.: "Expression of human GFRα-1(GDNF receptor)at neuromuscular junction and myelinated nerves."Neurosci. Lett.. 269. 55-57 (1999)
• [Publications] Suzuki, H.: "Roles of tachykinins in the synaptic mechanisms in the rat amygdala."Brain Res.. 848. A34 (1999)
• [Publications] 鈴木秀典: "アポトーシスと神経栄養因子"脳と発達. 31. 129-134 (1999)
• [Publications] 長谷麻子: "ヒト骨格筋における GDNF(グリア細胞株由来神経栄養因子)の発現"脳の科学. 21. 883-886 (1999)