1999 Fiscal Year Annual Research Report
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11680624
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
柴崎 芳一 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (80196419)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
梶尾 裕 東京大学, 医学部・附属病院, 医員
片桐 秀樹 東京大学, 医学部・附属病院, 医員
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| Keywords | イノシトール / キナーゼ / ホスホリパーゼD / 小胞輸送 / 低分子量G蛋白 / アクチン / PHドメイン / ラフリング |
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| Research Abstract |
1 構造面から
(1)変異PIP5Kの解析:N端又はC端からの欠失を作成することにより、PIP5KcDNAは中央約380アミノ酸にキナーゼ活性がみとめられ、両端はそれぞれこれを調節する機能を有すると考えられる。これは報告されたPIP4Kの3次元構造の解明結果ともよく一致する。
(2)PIP5K3次元構造解明のための結晶形成はまだその目的を達していない。
2 機能面から
(1)PIP5Kの細胞内局在: PIP2増減は細胞内で空間的に制御されている。 その合成をPIP5Kが行うが、内因性のPIP5Kは発現レベルが低く検出が容易でない。 外因性のPIP5Kは細胞質と細胞膜ともに存在していた。これは細胞分画によるWestern法でも確認された。上記欠失ミュータントの解析により、細胞内局在に責任のあるドメインを解析している。
(2)他のイノシトールリン脂質の合成: PIP5Kの過剰発現が各種イノシトールリン脂質の量にどのように影響するかを解析するため、細胞より脂質を抽出し脱アシル後、液体クロマトグラフィー(HPLC)により分離しPI-4,5-P2以外に PI-5-P、PI-3、5-P2が生成されることが判明した。
(3)アクチン重合への影響を種々のミュータントPIP5Kで検討している。
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[Publications] Ishihara H.: "Type I Phosphatidylinositol-4-phosphate 5-kinases"J.Biol.Chem. 273. 8741-8748 (1998)
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[Publications] Tolias K.F.: "Type I Phosphatidylinositol〜"J.Biol.Chem. 273. 18040-18046 (1998)
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[Publications] 柴崎 芳一: "ホスファテジルイノシトール 5-キナーゼ"生 化 学. 71(3). 193-197 (1999)
