1999 Fiscal Year Annual Research Report
糖尿病患者骨格筋で強発現しているRasファミリーGTP結合蛋白質Radの機能解析
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11680629
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
堀内 久徳 京都大学, 医学研究科, 助手 (90291426)
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| Keywords | Rad / GTP結合蛋白質 / 糖尿病 |
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| Research Abstract |
インスリン非依存性糖尿病(NIDDM)患者骨格筋で強発現しているRasファミリーGTP結合蛋白質Radの機能を明を目標に研究を進めた。まず、骨格筋においてRadと結合する蛋白質を同定すべく、すでに作成・精製したGST-Radを用いたアフィニティークロマトグラフィーを試みたが、Radと会合している可能性のある蛋白質は同定できなかった。リガンドオーバーレイ法、すなわち、サンプルをSDS-PAGE後ニトロセルロース膜にブロットし、その膜上の蛋白質を界面活性剤等を用いてRenatureする。そして、その膜を[32P]GTP-Radと反応させ、洗浄後にオートラジオグラフィーで、[32P]GTP-Rad結合蛋白質を検出するという方法も不可能であった。抗Radモノクローナル抗体を作製し得たので、Radと共に免疫沈降される蛋白質を検索中である。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] H,Ozaki: "Combined treatment of TNF-α and INF-α causes redistribution of junctional adhesion molecule in human endothelial cells"J.Immunol.. 163. 553-557 (1999)
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[Publications] H.Yoshida: "Compensated endocytosis of LDL by hamster cells co-expressing the two distinct mutant LDL receptors defective in endocytosis and ligand binding"J.Lipid Res.. 40. 814-823 (1999)
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[Publications] T.Kita: "Oxidized LDL and expression of monocyte adhesion molecules"Diabetes Res.Clin.Practice. 45. 123-126 (1999)
