マウス胚のオーガナイザー・脊索形成に関与する新規転写因子の単離と機能解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11680722
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 佐々木 洋 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助手 (10211939)
• Keywords: オーガナイザー / 脊索 / Foxa2 / エンハンサー / 転写調節機構 / マウス

Research Abstract

脊椎動物の体の形成には、オーガナイザーと脊索が重要な働きをしている。そこで本研究は、それらの形成に必須な転写因子HNF3β/Foxa2の遺伝子発現制御領域の解析を基礎として、オーガナイザーと脊索の形成に関与する新規の転写因子の単離を目指した。マウスFoxa2のエンハンサーを他種のFoxa2のエンハンサーと比較することにより、種間で保存された3つの配列を同定した。そのうちCS3という配列はエンハンサー活性に必須であった。酵母One-hybrid法により、CS3に結合する転写因子としてp65(RelA)を同定した。マウス胚7.0-7.5日胚において、p65のタンパク質は胚全体で弱く発現していたが、Foxa2が発現しているノード・脊索においては、p65の発現が周囲より明らかに強くなっていた。また、p65は培養細胞P19においてFoxa2エンハンサーをCS3依存的に活性化した。これらの結果からp65がFoxa2のエンハンサーの活性化因子として機能する事により、オーガナイザー・脊索の形成に関与していると考えられた。p65は細胞外のシグナルによって活性化される転写因子であることから、オーガナイザー・脊索の形成には、p65を活性化するシグナルの関与が考えられる。そのシグナルの実体を明らかにするとともに、このシグナルと、オーガナイザー形成に働く既知の2つのシグナル(Wnt様シグナルとnodal/activin様のシグナル)が、オーガナイザーの形成においてどの様な役割を果たしているのかを明らかにすることが今後の課題である

Research Products

• [Publications] Nishizaki et al.: "Identification of essential sequence motifs in the node/notochord enhancer of Foxa2 (Hnf3β) gene that are conserved across vertebrate species."Mech.Dev.. (In press). (2001)
• [Publications] Grachtchouk et al.: "Basal cell carcinomas in mice overexpressing Gli2 in skin."Nat.Genet.. 24. 216-217 (2000)