2000 Fiscal Year Annual Research Report
IL-7レセプター・シグナル伝達分子によるV-J組み換え誘導機構
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11694264
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| Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
生田 宏一 京都大学, 医学研究科, 助教授 (90193177)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷口 善仁 京都大学, 医学研究科, 助手 (00324616)
木下 和生 京都大学, 医学研究科, 助手 (50293874)
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| Keywords | サイトカインレセプター / STAT / γδT細胞 / シグナル伝達 / DNA組換え / ヒストンアセチル化 / 転写共役因子 |
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| Research Abstract |
IL-7はリンパ球前駆細胞の増殖因子であり、生体内におけるリンパ球の分化にきわめて大きな役割を果たしている。本研究の目的は、IL-7レセプター(IL-7R)のシグナル伝達分子のSTAT5によるgermline転写の誘導が、TCRγ遺伝子座のDNA組換え酵素に対するaccessibilityを上昇させV-J組換えを誘導する機構を解明することにある。
転写共役因子はヒストン・アセチル基転移酵素活性を持ち、周辺のヒストンをアセチル化しヌクレオソーム構造をゆるめて、転写装置が働くことを促している。そこでまず、STAT5が転写共役因子であるCBPやp300と協調して転写を活性化するかを調べた。5′Jγ1プロモーター領域をBa/F3細胞に導入すると、STAT5依存的およびCBP/p300依存的に転写が活性化された。また、Ba/F3細胞でJγ1領域特異的にヒストンがアセチル化されていることが、染色体免疫沈降法により示された。また、BaF3/pim-1細胞でサイトカイン刺激依存的にSTAT5とCBP/p300がJγ1領域に結合し、ヒストンがアセチル化されることを確認した。さらに、Ba/F3細胞にRAG1とRAG2を一過性に発現させると、Jγ1遺伝子のみでDNAの切断が起ることが、LM-PCR法にて示された。一方、IL-7R欠損マウスの初期胸腺細胞において、TCRγ遺伝子座のヒストンは脱アセチル化されていた。IL-7R欠損マウスのT前駆細胞にIL-7RやSTAT5cDNAを導入し、胎児胸腺器官培養でT細胞に分化させると、TCRγ遺伝子座のヒストンアセチル化が回復することを確認した。以上のことから、STAT5が転写共役因子を5′Jγ1プロモーター領域にリクルートし、ヒストンのアセチル化を介してTCRγ遺伝子座のaccessibilityを上昇させることが示された。
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[Publications] Kina,T. et al.: "The monoclonal antibody TER-119 recognizes a molecule associated with glycophorin A and specifically marks the late stages of murine erythroid lineage"Brit.J.Heamatol. 109. 280-287 (2000)
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[Publications] Fagarasan,S. et al.: "Alymphoplasia (aly)-type nuclear factor κB-inducing kinase (NIK) causes defects in secondary lymphoid tissue chemokine receptor signaling and homing of peritoneal cells to the gut-associated lymphatic tissue system"J.Exp.Med.. 191. 1477-1486 (2000)
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[Publications] Kamata,T. et al.: "Increased frequency of surface IgA-positive plasma cells in the intestinal lamina propria and decreased IgA excretion in hyper IgA (HIGA) mice, a murine model of IgA nephropathy with hyperserum IgA"J.Immunol.. 165. 1387-1394 (2000)
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[Publications] Watanabe,N. et al.: "Migration and differentiation of autoreactive B-1 cells induced by activated γδ T cells in anti-erythrocyte immunoglobulin transgenic mice"J.Exp.Med.. 192. 1577-1586 (2000)
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[Publications] Fagarasan,S. et al.: "Mechanism of B1 cell differentiation and migration in GALT"Current Topics in Microbiology and Immunology. 252. 221-229 (2000)
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[Publications] Agata,Y. et al.: "Histone acetylation determines the developmentally regulated accessibility for T cell receptor-γ gene recombination"J.Exp.Med.,. (in press).
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[Publications] Honda,K. et al.: "Molecular basis for hematopoietic/ mesenchymal interaction during initiation of Peyer's patch organogenesis"J.Exp.Med.,193 :. 193(in press).
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[Publications] O'Brien,R.L. et al.: "Increased resistance to bacterial infection in mice lacking Vγ1+γδ T cells"J.Immunol.,. (in press).
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[Publications] Ikuta.K. et al.: "Role of the IL-7 receptor in gamma-delta T cell development"Chem.Immunol.,. (in press).
