1999 Fiscal Year Annual Research Report

新規のイノシトール1,4,5-三リン酸結合蛋白質の機能に関する研究

Research Project

Project/Area Number	11694288
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	平田雅人九州大学, 歯学部, 教授 (60136471)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	八木澤仁姫路工業大学, 理学部, 助教授 (40192380) 竹内弘九州大学, 歯学部, 助手 (70304813) 兼松隆九州大学, 歯学部, 助教授 (10264053)
Keywords	Ins(1,4,5)P_3 / カルシウムイオン / 細胞機能 / ホスホリパーゼC
Research Abstract	分子量が130kDの新規のイノシトール1,4,5-三リン酸[Ins(1,4,5)P_3]結合蛋白質を見い出し、p130と名付けた。p130はプレックストリン相同領域(PHドメイン)を有し、ここでIns(1,4,5)P_3やホスファチジルイノシトール4,5-二リン酸[PtdIns(4,5)P_2]と結合する。この蛋白質の機能を解明するために安定的にp130を発現するCOS-1細胞株を作製した。細胞内のp130は同じくPHドメインを持つホスホリパーゼC-δ(PLC-δ)とは異なり決して細胞膜に局在することなく、細胞質中に均一に分布していた。ブラジキニン(Bk)や上皮成長因子(EGF)刺激に伴う細胞内Ca^<2+>濃度変化を測定したところ対照に比し、Bk刺激によるCa^<2+>反応の減弱化が認められた。EGF 刺激の場合も基本的には同じ結果が得られた。この原因として二つのことが考えられる。発現したp130が細胞膜の内側にあるPtdIns(4,5)P_2に結合して、PLC活性化による加水分解を抑制したか、あるいは、PLC活性化によって生成したIns(1,4,5)P_3がp130によって結合され、小胞体上の受容体に結合する量を減らしたためか、である。これを区別するため、Bk刺激によって細胞内に生成したIns(1,4,5)P_3を定量した。刺激前の量はp130を過剰発現した細胞のほうがむしろ多く、刺激に伴って生成するIns(1,4,5)P_3量に対照との相違は認められなかった。この結果は後者の可能性が高いことを支持している。したがって、p130は細胞内Ca^<2+>反応のnegative regulatorとして働いている可能性が考えられる。そのことにより、種々の細胞機能の抑制に関わっている可能性がある。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Hirata,M.: "Intrinsic inhibitor of inositol 1,4,5-trisphosphate binding."Mol. Cell. Biochem.. 190. 179-184 (1999)
[Publications] Yoshimura,K.: "Use of phosphorofluoridate analogues of D-myo-inositol 1,4,5-trisphosphate to assess the involvement of ionic interactions in its recoginition by the receptor and metabolising enzymes"Cell. Signal.. 11. 117-125 (1999)
[Publications] Caffrey,J.J.: "Multiple inositol polyphosphate phosphatase ; Molecular cloning of the human form of an enzyme in endoplasmic reticulum that is up-regulated during chondrocyte hypertrophy"FFBS Lett.. 442. 99-104 (1999)
[Publications] Takeuchi,H.: "Membrane association of a new inositol 1,4,5-trisphosphate binding protein,p130 is not dependent on the pleckstrin homology domain"Chem. Phys. Lipids. 98. 35-47 (1999)
[Publications] Matsuki,N.: "Antibodies against the PH domain of phospholipase C-δ1 inhibit Ins(1,4,5)P3-mediated Ca2+ release from the endoplasmic reticulum"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 260. 42-47 (1999)
[Publications] Yamamoto,T.: "Involvement of EF hand motifs in the Ca2+ -dependent binding of the pleckstrin homology domain to phosphoinositides"Eur. J. Biochem.. 265. 481-490 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

新規のイノシトール1,4,5-三リン酸結合蛋白質の機能に関する研究

Principal Investigator

平田 雅人 九州大学, 歯学部, 教授 (60136471)

Research Products

[Publications] Hirata,M.: "Intrinsic inhibitor of inositol 1,4,5-trisphosphate binding."Mol. Cell. Biochem.. 190. 179-184 (1999)

[Publications] Yoshimura,K.: "Use of phosphorofluoridate analogues of D-myo-inositol 1,4,5-trisphosphate to assess the involvement of ionic interactions in its recoginition by the receptor and metabolising enzymes"Cell. Signal.. 11. 117-125 (1999)

[Publications] Caffrey,J.J.: "Multiple inositol polyphosphate phosphatase ; Molecular cloning of the human form of an enzyme in endoplasmic reticulum that is up-regulated during chondrocyte hypertrophy"FFBS Lett.. 442. 99-104 (1999)

[Publications] Takeuchi,H.: "Membrane association of a new inositol 1,4,5-trisphosphate binding protein,p130 is not dependent on the pleckstrin homology domain"Chem. Phys. Lipids. 98. 35-47 (1999)

[Publications] Matsuki,N.: "Antibodies against the PH domain of phospholipase C-δ1 inhibit Ins(1,4,5)P3-mediated Ca2+ release from the endoplasmic reticulum"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 260. 42-47 (1999)

[Publications] Yamamoto,T.: "Involvement of EF hand motifs in the Ca2+ -dependent binding of the pleckstrin homology domain to phosphoinositides"Eur. J. Biochem.. 265. 481-490 (1999)

平田雅人九州大学, 歯学部, 教授 (60136471)