男子不妊症の診断,治療法の開発:精子運動抑制因子を含めた原因遺伝子からのアプローチ

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11694320
• Research Institution: St.Marianna University School of Medicine
• Principal Investigator: 岩本 晃明 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (60046117)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐藤 三佐子 日本ロシュ(株), 研究所内・(株)エイジーン研究所, 研究員 ; 古市 泰宏 日本ロシュ(株), 研究所内・(株)エイジーン研究所, 所長(研究職) ; 野澤 資亜利 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (40167573)
• Keywords: 男子不妊症 / semenogelin / 精子運動抑制因子 / 遺伝子診断 / capacitation / Y染色体DNA多型

Research Abstract

男子不妊症の診断法と治療法の開発を目指し、基礎・臨床の両面から研究を行い、次のような知見が得られた。
臨床的研究
平成11年度に引き続き、男子不妊症患者のDNA収集を行い、現在約600名のジーンバンク構築を終えた。このジーンバンクを用いてTwo dimensional gene scanning(TDGS)によりSemenogelin(Sg)遺伝子の検索を行っているが、multiple PCRに問題があり、現在のところ全エクソンを同時に検出することが出来ていない。今後primerのデザインや泳動条件を検討し、一枚のゲル上で全スポットの検出を目指す。また、前年度までの研究でSgIの第2エクソンに欠失のあった健常人について、精漿中Sg蛋白を分析したところ分子量の小さいSgIが検出され、現在この蛋白を精製し、変異蛋白の機能を解析中である。
基礎的研究
Sgの機能に関する研究として、精子capacitationに対する影響を検討したところ、Sgは濃度依存性にヒト精子のcapacitationを抑制することが判明した。その作用機序はO_2^-の生成抑制であり、Sgが精子によって分解された分解物も同様の作用を持つことなどを明らかにし、結果をJ.Androl.に投稿し、現在印刷中である。
また神奈川県警察科学捜査研究所・佐藤博士との共同研究で、r-Sgを抗原にして作製した抗体を用い、精漿成分を特異的に検出することを目的としたアッセイ系の開発に成功し、その第一報をForensic Science Int.に投稿し、現在印刷中である。今後はモノクローナル抗体作成を引き続き行い、更にこのアッセイ系の感度および特異性を高めるよう開発を進める。

Research Products

• [Publications] de Lamirande E,Yoshide K,Yoshiike M,Iwamoto T and Gagnon C: "Semenogelin, the main protein of semen coaglum, inhibits human sperm capacitation by interferring with the superoxide anion generated during this process."Journal of Andrology. (in press). (2001)
• [Publications] Satoh I,Yoshiike M,Yamasaki T,Yoshida K,Takano S and Iwamoto T: "A dot-blot-immunoassay for semen identification using a polyclonal antibody against semenogelin : a powerful seminal maker."Forensic Science International. (in press). (2001)