チロシンホスファターゼとアダプター分子による免疫系の制御機構

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11694335
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• Principal Investigator: 矢倉 英隆 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都神経科学総合研究所, 参事研究員 (60166486)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 水野 一也 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都神経科学総合研究所, 副参事研究員 (00219643) ; 片桐 達雄 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都神経科学総合研究所, 主事研究員 (00233742) ; 荻本 真美 財団法人 東京都医学研究機構, 東京都神経科学総合研究所, 主事研究員 (80158609)
• Keywords: チロシンホスファターゼ / アダプター分子 / CD45 / SHP-1 / BLNK / SLP-65 / SLP-76 / Lyn

Research Abstract

本研究では、チロシンホスファターゼとアダプター分子を介するリンパ球シグナルの制御についての理解を深めることを目標にしている。今年度の解析から、以下の成果を得た。
(1)CD45によるSrc型チロシンキナーゼの制御:未熟B細胞WEHI-231におけるCD45の基質はLynである。CD45は、定常状態においてLynのネガティブ制御部位のみならずポジティブ制御部位の脱リン酸化を行い、不活化している。しかし、B細胞抗原レセプター(BCR)刺激後にはLynの両制御部位のリン酸化が亢進して活性化されることから、BCR刺激に一致してCD45の抑制効果が解除される機構の存在が示唆された。成熟B細胞BAL-17では、CD45の基質はFynであり、定常状態では両制御部位の脱リン酸化により不活化され、BCR刺激がCD45の抑制効果を解除することが明らかになった。ネガティブ制御部位を脱リン酸化することによりチロシンキナーゼを活性化するのがCD45の役割とされてきたが、新たなモデルの構築が求められる。現在、CD45の抑制効果が解除される機構について解析している。
(2)CD45によるMAPKの制御:CD45はWEHI-231とBAL-17細胞において異なる様式でMAPKを制御すること、MAPKのメンバー(ERK、JNK、p38)特異的な制御を行うことが明らかになった。さらに、BAL-17で見られるBCRによる細胞増殖抑制は、JNKとp38との共同作用により誘導され、CD45はこの過程に不可欠な酵素であることが明らかになった。
(3)SHP-1の基質の同定とリンパ球シグナルの制御:SHP-1のB細胞における基質をトラッピング法により解析した。その結果、B細胞アダプター蛋白BLNKがそのひとつであること、さらに、SHP-1とBLNKのシグナルは、MAPKの中でJNKを選択的に抑制し、,アポトーシスを制御していることが明らかになった。現在、2つのアダプター蛋白(BLNKとSLP-76)の役割分担について解析している。

Research Products

• [Publications] Hasegawa, K.: "Requirement of PEST domain tyrosine phosphatase PEP in B cell antigen receptor-induce growth arrest and apoptosis"Eur. Immunol.. 29. 887-896 (1999)
• [Publications] Katagiri, T.: "CD45 negatively regulates Lyn activity by dephosphorylating both positive and negative regulatory tyrosine residues in immature B cells"J. Immunol.. 163. 1321-1326 (1999)
• [Publications] Adachi, T.: "CD72 negatively regulates signaling through the antigen receptor of B cells"J. Immunol.. 164. 1223-1229 (2000)
• [Publications] Mizuno, K.: "SHP-1 dephosphorylates BLNK/SLP-65 and selectively regulates c-Jun NH_2-terminal kinase activation in B cells"J. Immunol.. (in press).
• [Publications] Schraven B.: "Integration of receptor-mediated signals in T cells by transmembrane adaptor proteins"Immunology Today. 20. 431-434 (1999)
• [Publications] Pingel, S.: "The CD45 tyrosine phosphatase regulates CD3-induced signal transduction and T cell development in recombinase-deficient mice : restoration of pre-TCR function by active p56 (lck)"Eur. J. Immunol.. 29. 2376-2384 (1999)