ナス科体細胞雑種植物のRAPD分析による品種識別及びその評価

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11760029
• Research Institution: Sasebo National College of Technology
• Principal Investigator: 村川 智子 佐世保工業高等専門学校, 助手 (60280492)
• Keywords: ナス近縁野生種 / RAPD分析 / プロトプラスト

Research Abstract

1.体細胞雑種におけるRAPD分析
ナス近縁野生種Solanum toxicariumとSolanum sisymbriifoliumとの体細胞雑種植物を約20個体作出し、その雑種性確認のためRAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)分析を行った。若葉からCTAB法に従って抽出した全DNAを鋳型として12merのランダムプライマーおよびTth DNAポリメラーゼを用いてPCR(Polymerase chain reaction)を遺伝子増幅装置を用いて行った。尚、反応は94℃30秒、40℃2分、72℃3分を45反復し、更に72℃で7分保温した。PCR増幅産物については、RAPDによるDNA分析を行った後、トランスイルミネーターで観察した。
結果は以下の通りである。
(1)検索に用いたプライマー数は46種、その内雑種識別可能なプライマー数は29種であった。
(2)種特異的なバンド数はSolanum toxicariumが57本、Solanum sisymbriifoliumが52本であった。体細胞雑種植物において、Solanum toxicriumの種特異的な57本のバンドは全て保持されていたが、Solanum sisymbriifoliumの種特異的バンドは52本中51本と殆ど脱落し、1本しか検出できなかった。
この結果は、体細胞雑種と同定した20個体で全て同じ結果となった。
2.体細胞雑種の染色体数
染色体数はSolanum toxicarium、Solanum sisymbriifolium共に2n=24であるが、RAPD分析で体細胞雑種と確認された植物は24本、48本の2種が確認された。