2000 Fiscal Year Annual Research Report
タイト結合構成蛋白クラウディンの機能についての分子解剖学的研究
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11770008
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
稲井 哲一朗 九州大学, 医学研究院, 講師 (00264044)
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| Keywords | claudin-1 / ZO-1 / tight junction / freeze fracture / epithelial barrier / MDCK cell |
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| Research Abstract |
タイト結合(TJ)構成蛋白claudin-1(CL-1)は、N末とC末を細胞質側に向け細胞膜を4回貫通している。また、TJの裏打ち蛋白であるZO-1は、CL-1のC末と結合している。(1)CL-1のC末にmyc-tagを付けて、MDCK細胞で過剰発現した。その結果、transepithelial electrical resistance(TER)値が上昇し、FITC-dextranによる細胞間透過性が減少した。このことから、CL-1の過剰発現によりMDCK細胞のバリア機能が亢進することがわかった。この結果はEuropean Journal of Cell Biology 78(12):849-855,1999に発表した。(2)CL-1のZO-1結合ドメインと考えられているC末端領域を除去してMDCK細胞で発現した。これをΔCmycと呼ぶ。その結果、本来TJがない細胞の側面膜に、TJ様の構造ができることがフリーズフラクチャーの観察でわかった。フラクチャーラベルにより、このTJ様のストランドはΔCmycで構成されていることがわかった。このことから、CL-1はZO-1との結合非依存性にTJ様のストランドを形成できるが、このストランドがTJへ局在化するためにはZO-1との結合が関与していることが示唆された。ΔCmycの発現によりTER値はやや上昇するが、FITC-dextranによる細胞間透過性はほとんど変化しなかった。
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Research Products
(1 results)
