受容体チロシンキナーゼEGFレセプターの糖鎖構造のリモデリングによる増殖制御

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11770062
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 高橋 素子 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (00303941)
• Keywords: 糖転移酵素 / GnT-III / シグナル伝達 / 増殖因子 / EGFレセプター / エンドサイトーシス

Research Abstract

本研究ではHeLaS3細胞にGnT-III遺伝子を導入することによって、EGFシグナル経路にどのような変化が起こるかを検討した。^<125>I-EGFを用いた実験によってGnT-III導入細胞ではEGFレセプターのEGF結合能が低下していることが明らかとなったが、スキャッチャード解析により、これは主に低親和性受容体の減少によるものであることがわかった。高親和性受容体には変化がみられず、EGFレセプターの自己リン酸化の程度には変化がないことがわかった。一方、GnT-III導入細胞では受容体のエンドサイトーシスが亢進し、ERKの活性化が上昇することが明らかとなった。受容体のエンドサイトーシスの変化の機序を検討したところ、GnT-III導入細胞ではエンドサイトーシスに関与すると考えられているEGFレセプターのCaInドメイン中の^<996>Q-^<1022>Tに修飾がおこっていることが示唆された。この^<996>Q-^<1022>Tという配列はEGFレセプターの細胞内ドメインに存在するため、糖鎖に直接関係した修飾ではないと考えられる。現在精製EGFレセプターのペプチドマッピングをおこなうことにより、その修飾の位置と種類の同定を行っている。今後、この修飾がEGFシグナル経路にどのように影響するかをさらに検討する予定である。

Research Products

• [Publications] Wu X.,Takahashi M., et al.: "Cloning of amadoriase I isozyme from Aspergillus sp : Evidence of FAD covalently linked to Cys342."Biochemistry. 39. 1515-1521 (2000)
• [Publications] Sato Y.,Takahashi M., et al.: "Overexpression of N-Acetylglucosaminy Itransferase III enhances the EGF-induced phophorylation of ERK in HeLaS3 cels by upregulation of the internalization rate of the receptors."J.Biol.Chem.. (2001)
• [Publications] Kon YH. et al.: "Aldehyde reductase gene expression by lipid peroxidation end products, MDA and HNE."Free Rad.Res.. (2001)