1999 Fiscal Year Annual Research Report

神経分化、再生におけるGDNF/Ret系の機能解析

Research Project

Project/Area Number	11770116
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	岩下寿秀名古屋大学, 医学部, 講師 (00283432)
Keywords	RETプロトオンコジーン / 多発性内分泌腫瘍症2型 / GDNF / チロシンキナーゼ / ヒルシュスプルング病
Research Abstract	RETプロトオンコジーン(以下RET)はGDNF(グリア細胞株由来神経栄養因子)、NTN等のGDNFファミリーをリガンドとする受容体型チロシンキナーゼをコードし、甲状腺髄様癌、副腎褐色細胞腫を遺伝的に発症する多発性内分泌腫瘍症(MEN)2A型、2B型、家族性甲状腺髄様癌及び大腸腸管神経節が欠損したために生じるヒルシュスプルング症(以下HSCR病)の原因遺伝子であることが明らかになっている。本研究ではHSCR病型変異を有するRET蛋白の不活化する機序を生化学的に解析した。 RETにHSCR病に認められた10種類の変異(E762Q,S765P,S767P,R873Q,F893L,R897Q,E921K,R972G,P973L,M980T)を導入し、神経系細胞SK-N-MCに発現を試みた。10種類のうち9種類のHSCR病型変異に(E762Q,S765P,S767P,R873Q,F893L,R897Q,E921K,R972G,M980T)ついては、RET蛋白の良好な発現を得ることができ、コントロール(cーRET)の同程度であった。1種類(P973L)の変異を有するRET蛋白の発現はほとんど認められなかった。4種類(E762Q,S767P,R972G,M980T)の変異を有するRET蛋白はcーRET蛋白と較べてRETのチロシンリン酸化は1/2から1/3にまで減少した。また、SHC、PLC-γ及びPI-3K等のシグナル伝達機構も中等度障害されていることが明らかにされた。5種類(S765P,R873Q,F893L,R897Q,E921K)の変異を有するRET蛋白はGDNFによってまったく活性化されず、シグナル伝達機構も完全に障害されていた。この5種類の変異は完全なloss-of-function mutationであることが証明された。P973Lの変異を有するRET蛋白の減少は蛋白レベルの減少ではなく、mRNAレベルでの減少に原因があった。以上のことから、HSCR病の変異を有するRET蛋白の不活性化には、少なくとも3種類の機序があることが考えられた。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Toshihide Iwashita: "A Two-Hit model for development of multiple endocrine neoplasia type 2B by RET mutations."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 268. 804-808 (2000)
[Publications] Masashi Kato: "Ultraviolet light induces redox reaction-mediated dimerization and superactivation of oncogenic ret tyrosine kinases."Mol.Biol.Cell.. 11. 93-101 (2000)
[Publications] Yoshihiro Ishiguro: "The role of amino acids surrounding tyrosine 1062 in ret in specific binding of the shc phosphotyrosine-binding domain,"Endocrinology. 49. 1231-1237 (1999)
[Publications] Toshihide Iwashita: "Biological and biochemical properties of Ret with kinase domain mutations identified in multiple endocrine neoplasia type 2B and familial medullary thyroid carcinoma."Oncogene. 18. 3919-3922 (1999)
[Publications] Seiko Nakayama: "Implication of expression of GDNF/Ret signalling components in differentiation of bone marrow haemopoietic sells."British J.Haematol.. 105. 50-57 (1999)
[Publications] Hideki Murakami: "Rho-dependent and-independent tyrosine phosphorylation of focal adhesion kinase,paxillin and p130Cas mediated by Ret kinase."Oncogene. 18. 1975-1982 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

神経分化、再生におけるGDNF/Ret系の機能解析

Principal Investigator

岩下 寿秀 名古屋大学, 医学部, 講師 (00283432)

Research Products

[Publications] Toshihide Iwashita: "A Two-Hit model for development of multiple endocrine neoplasia type 2B by RET mutations."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 268. 804-808 (2000)

[Publications] Masashi Kato: "Ultraviolet light induces redox reaction-mediated dimerization and superactivation of oncogenic ret tyrosine kinases."Mol.Biol.Cell.. 11. 93-101 (2000)

[Publications] Yoshihiro Ishiguro: "The role of amino acids surrounding tyrosine 1062 in ret in specific binding of the shc phosphotyrosine-binding domain,"Endocrinology. 49. 1231-1237 (1999)

[Publications] Toshihide Iwashita: "Biological and biochemical properties of Ret with kinase domain mutations identified in multiple endocrine neoplasia type 2B and familial medullary thyroid carcinoma."Oncogene. 18. 3919-3922 (1999)

[Publications] Seiko Nakayama: "Implication of expression of GDNF/Ret signalling components in differentiation of bone marrow haemopoietic sells."British J.Haematol.. 105. 50-57 (1999)

[Publications] Hideki Murakami: "Rho-dependent and-independent tyrosine phosphorylation of focal adhesion kinase,paxillin and p130Cas mediated by Ret kinase."Oncogene. 18. 1975-1982 (1999)

岩下寿秀名古屋大学, 医学部, 講師 (00283432)