2000 Fiscal Year Annual Research Report
神経系,内分泌系を介したストレスのランゲルハンス細胞への影響の解析
Project/Area Number |
11770438
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
小澤 宏明 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (10282047)
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Keywords | 樹状細胞 / ランゲルハンス細胞 / ホルモン / エストロゲン / レセプター |
Research Abstract |
ヒト正常皮膚からランゲルハンス細胞を酵素やマグネティックビーズを用いて約97%まで単離精製、また末梢血単核細胞からGM-CSF、IL-4の添加により樹状細胞を誘導する。これら2種類の樹状細胞から、mRNAを抽出してRT-PCR法を使い、4種類の性ホルモンレセプター、すなわちestrogen receptor α_(ERα)、estrogen receptor β_(ERβ)、progesterone receptor(PR)、androgen receptor(AR)の発現を調べた。このうち、ERαについては、ランゲルハンス細胞、単球由来樹状細胞いずれもが発現していたが、他の3つは検出されなかった。さらに,これらヒト由来の細胞から抽出した蛋白質を使ってwestern blot法を行ったところ、やはり、4種類のホルモン受容体のうちERαのみの発現が確認された。樹状細胞でエストロゲン受容体の発現が確認されたため、これらの細胞に生体内における主要なエストロゲンである17 β-estradiol(E2)を加えて3日間培養し、細胞表面のMHC class II抗原、CD54、CD80、CD86の発現の変化を調べた。しかし、フローサイトメトリーを用いた解析では明らかな変化は確認できなかった。さらに、これらの樹状細胞を抗原提示細胞にして、アロのT細胞の刺激能を調べたが、こちらもE2による明らかな影響は観察されなかった。
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