1999 Fiscal Year Annual Research Report
^<99mm>Tc-MIBIによる抗癌剤感受性の評価の研究
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11770510
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| Research Institution | Kagawa Medical School |
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Principal Investigator |
西山 佳宏 香川医科大学, 医学部・附属病院, 助手 (50263900)
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| Keywords | ^<99mm>Tc-MIBI / 薬剤耐性 / MDR / MRP / 耐性克服薬 |
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| Research Abstract |
化学療法に対する多剤耐性の機序は複雑で様々なメカニズムが考えられ,その一つに腫瘍細胞の細胞膜に存在するmulti-drug resistance(MDR)やMRP(MDR-related protein)の関与が示唆されている。^<99m>Tc-MIBIもMDRやMRPで排泄される薬剤の一つとされ,^<99m>Tc-MIBIを用いたシンチグラムで集積程度の低いものはMDRやMRPの機能が亢進していると考えられ,ある種の抗癌剤に耐性を示すものと推察される。その一方で,ベラパミールなどのカルシウム拮抗薬やシクロスポリンなどの免疫抑制剤に多剤耐性克服薬剤としての作用があることが報告されている。つまり,多剤耐性克服薬剤はMDRやMRPに直接作用し,耐性細胞において亢進した抗癌剤の細胞内からの排出を阻害するものである。そこで多剤耐性腫瘍細胞において多剤耐性克服薬剤を用いて,^<99m>Tc-MIBIの腫瘍への取り込みの変化を観察し,耐性克服薬剤の影響をin vitroで検討を行う事を目的とした。
方法としてヒト由来の癌細胞であるSNB19,U87を50U/ml penicillin G、50U/ml streptomycin、10%牛胎仔血清を添加したIMEM培養液中にて継代培養した。更にそれぞれの細胞を低濃度vincristineの存在下、5ケ月間培養しそれぞれをクローニングし、低濃度耐性株とした。さらにその一部には高濃度vincristineの存在下で4ケ月間培養を続け高濃度耐性株を樹立した。次に、Reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)法でMDRの発現を調べた。まずISOGEN^Rを用いてphenolchloroform single step法によりtotal RNAを抽出した。RT-PCRはFirst-Strand cDNA Synthesis Kit^Rを使用して行った。primerはMDR1を用い、30もしくは35サイクルでPCR反応を行い、薬剤耐性遺伝子のmRNA発現を検索した。今回樹立したvincristine耐性株においてMDR1は陽性で、親株は陰性であった。
今後はこの耐性株群と親株群に^<99m>Tc-MIBIを添加し、インキュベートの後well counterでそれぞれの群のカウント数を調べ、更にベラパミールやシクロスポリンなどの多剤耐性克服薬剤を添加し、再度^<99m>Tc-MIBIを加えそれぞれの群のカウント数を調べ、前述の結果と比較検討する。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] 山本 由佳: "原発性肺癌における^<99mm>Tc-MIBIと^<20l>Te-chlorideの原発腫瘍抽出能の比較検討"核医学. 33・5. 501-511 (1996)
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[Publications] 山本 由佳: "肺小細胞癌における^<99mm>Tc-MIBIによる化学療法の効果予測の可能性"日本医学放射線学会雑誌. 56・13. 980-981 (1996)
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[Publications] Yoshihiro Nishiyama: "Technetium-99m-MIBI and Thallium-201 scintigraphy of primary Lung Cancer"The Journal of Nuclear Medicine. 38・9. 1358-1361 (1997)
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[Publications] Yuka Yamamoto: "Companative study of Technetium-99m-sestamibi and Thallium-201 SPECT in Predicting Chematharapentic in small Cell Lung Cancer"The Journal of Nuclear Medicine. 39・9. 1626-1629 (1998)
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[Publications] Yuka Yamamoto: "Companative Evalnation of Tc-99m MIBI and Te-201 chloride SPECT in Non-small-Cell Lung Cancer Mediastinal Lumph Node Metastases"Clinical Nuclear Medicine. 25・1. 29-32 (2000)
