抗癌剤の作用におけるASK-1の関与

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11770584
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 杉本 耕一 順天堂大学, 医学部, 助手 (50281358)
• Keywords: ASK-1 / 抗癌剤 / アポトーシス

Research Abstract

白血病細胞株Jurkatにwild-typeまたはdominant-negativeのASK-1-EGFPの発現plasmidをtransfectし、G418存在下で培養してstableの細胞株を樹立した。これらの細胞株において、mutant ASK-1のtransfectantは、wild-typeのそれに比べてdoxorubicin、Ara-C等の抗癌剤による12-24時間の処理後のアポトーシスが60%程度に低下していた(TUNEL法)。抗癌剤への感受性の差異がASK-1の不活性化によることを生化学的に示す目的で、wild-typeおよびmutant ASK-1のtransfectantでの抗癌剤によるp38,JNKのリン酸化をphosphospecific antibodyを用いたWestern blottingで検討した。dominant-negativeのASK-1-EGFPの発現細胞ではp38およびJNKのリン酸化が少ない傾向が認められたが、ASK-1の活性化を十分には抑制していない可能性も考えられた。現在、IRES vectorを用いてEGFPとの融合型でないmutant ASK-1を発現したJurkat細胞を樹立中で、これを用いて同様の方法で抗癌剤感受性へのASK-1の関与を確定する予定である。

Research Products

• [Publications] Sugimoto K et al: "Inhibition of p34^<cdc2> dephosphorylation in DNA damage..."Br J Haematol. 105. 720-729 (1999)
• [Publications] Egashira M,Kawamata N,Sugimoto K et al.: "P-glycoprotein expression on normal..."Blood. 93. 599-606 (1999)