2000 Fiscal Year Annual Research Report
環境健康影響物質のバイオモニターリング技術の開発研究
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11793012
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
大川 秀郎 神戸大学, 農学部, 教授 (90233048)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
片桐 昌直 大阪教育大学, 教育学部, 助教授 (00185802)
井上 國世 京都大学, 大学院・農学系研究科, 教授 (10223249)
中田 昌伸 神戸大学, 農学部, 教授 (40031190)
三宅 司郎 (株)バイオ・アプライド・システムズ, 開発・営業部長(研究職)
川田 充康 大塚化学(株), 鳴門研究所, 主任研究員
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| Keywords | 環境健康影響物質 / マラチオン / シメトリン / エンドスルファン代謝物 / ビスフェノールA / モノクロナール抗体 / ELISA / scFv |
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| Research Abstract |
1.環境健康影響物質などのハプテン合成
殺虫剤マラチオン、除草剤シメトリン、環境ホルモンビスフェノールA、殺虫剤エンドスルファン代謝物などのハプテン、抗原(免疫原)などを合成した。
2.モノクローナル抗体の調製とELISAの確立
マラチオン、シメトリン、ビスフェノールA、エンドスルファン代謝物などに特異的に反応するモノクローナル抗体を調製し、それらを用いたELISAを確立した。
3.ELISA法の確立とバリデーション
ELISA法とGC法などを比較し、ELISAによって標的化合物をpptからppbレベルで測定が可能であった。
4.ELISA高感度検出系
ELISAの高感度検出系について各種の手法を比較すると共に新規方法の開発を試みた。
5.モノクローナル抗体可変領域scFvの調製
マラチオン、シメトリン、ビスフェノールAのモノクローナル抗体産生細胞からmRNAを調製し、cDNAを取得して、scFv c DNAを作製した。大腸菌に発現したscFvはそれぞれELISAにおいて相当するモノクローナル抗体と同等の反応性を示した。
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[Publications] M.Nakata: "A monoclonal antibody-based ELISA for the analysis of the insecticide flucythrinate in environmental and crop samples."Pest Manag Sci.. 57. 267-277 (2001)
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[Publications] H.Ohkawa: "Structures and Functions of Novel Cytochrome P450 Species Expressed During Flowering"Biotechnol. & Biotechnol.Eq. 14. 52-55 (2000)
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[Publications] 大川秀郎: "作物保護に係わる有用遺伝子の機能解析とその応用"農業及び園芸. 75. 795-799 (2000)
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[Publications] S.Miyake: "Simple Determination of Herbicides in Rice Paddy Water by Immunoassay. Pesticide Science : Environmental Fate and Effects of Pesticides.Eds by N.Umetsu and D.R.Baker, ACS Symposium Series"American Chemical Society, Washington, D.C.,USA. (2000)
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[Publications] 大川秀郎: "ファイトレメディエーションを目指した薬物代謝型P450発現植物の作出.「植物と微生物による環境修復」"(株)博友社. 27-48 (2000)
