2001 Fiscal Year Annual Research Report
臍帯血幹細胞のex vivo増幅デバイスの開発とその臨床応用
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11794036
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
堀田 知光 東海大学, 医学部, 教授 (70173606)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻 孝 日本たばこ産業, 医薬探索研究所, 主任研究員 (50339131)
加藤 俊一 東海大学, 医学部, 助教授 (70096212)
安藤 潔 東海大学, 医学部, 講師 (70176014)
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| Keywords | 臍帯血 / 造血幹細胞 / 体外増幅 / 造血幹細胞移植 / マウス骨髄ストローマ細胞株 / 膜分離型共培養系 / サイトカイン |
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| Research Abstract |
臍帯血は造血幹細胞胞移植に際し骨髄、末梢血に次ぐ第3の造血幹細胞供給源として近年注目を集めている。特に平成11年に発生した東海村における放射線被曝事故のような災害時には直ちに利用できる造血幹細胞供給源となる。しかし、膀帯血の最大の問題点は含有造血幹細胞数が限られており成人への適応が一部に限られていることである。申請者らは研究分担者である辻らが樹立したマウス骨髄ストローマ細胞株をfeeder layerとしたユニークな膜分離型共培養系を開発した。この培養系を利用して短期間に効率的な前駆細胞のex vivo増幅を可能にしたが応用する際の問題点として、(1)異種細胞に由来する微生物、異種蛋白などの混入の可能性、(2)培養系のスケールアップ化、(3)培養造血細胞の生着と造血維持の評価が重要となる。平成11、12年度で(1)(2)をほぼ解決し、本年度は(3)を定量的SRCアッセイを用いて評価した。
1 増幅臍帯血の定量的SRCアッセイ
NOD/SCIDマウスを用いて増幅前後の臍帯血CD34細胞のSRC頻度を測定した。増幅前後のCD34細胞を1x105,5x104,1x104,5x103個ずつ5-10匹のマウスに移植し、生着率を調べた。この結果よりSRC頻度を算出したところ、増幅前では1/46000、増幅後では1/48000の頻度であった。CD34細胞の増幅率が12倍であったので、SRCは10倍前後増幅されていることが明らかとなった。
以上の成果を元に今後、臨床1/2相試験により本増幅系の安全性を検討していく予定である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Ando K.: "Human CD34- Hematopoietic Stem Cells : Basic Aspects and Clinical Significance"International Journal of Hematology. (in press). (2002)
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[Publications] Oki M, Ando K, Hotta T, et al.: "Efficient Lentiviral Transduction into Human Cord Blood CD34+ Cells and Differentiation into Dendritic Cells"Experimental Hematology. 29. 1210-1217 (2001)
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[Publications] Kato S, Ando K, Hotta T, et al.: "Absence of CD34- Hematopoietic Precursor Population in the Recipients of CD34+ Stem Cell Transplantation"Bone Marrow Transplant. 28. 587-595 (2001)
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[Publications] Yu Y, Hagihara M, Ando K, Hotta T, et al.: "Enhancement of human cor d blood CD34+ cell-derived natural killer cell cytotoxicity by dendritic cells"Journal of Immunology. 166. 1590-1600 (2001)
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[Publications] Kawada H, Ando K, Hotta T, et al.: "Hematopoietic progenitors and stem cells in skeletal muscle"Tissue Engineering for Therapeutic Use. 6. 51-56 (2002)
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[Publications] Sato T, Ando K, Hotta T, et al.: "Acute lethal injury of lung and liver in mice transplanted with ex vivo expanded CTLs"Cell Transplantation. 10. 0409-412 (2001)
