2001 Fiscal Year Annual Research Report
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11839010
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
大森 幸子 名古屋大学, 環境医学研究所, 助手 (20233273)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
長屋 敬 新生会第一病院, 内科, 医長 (80262913)
神部 福司 名古屋大学, 環境医学研究所, 助教授 (00211871)
妹尾 久雄 名古屋大学, 環境医学研究所, 教授 (40135380)
山本 良平 倉敷紡績(株), 技術研究所, 主任研究員
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| Keywords | ダイオキシン / RDA / E16 / CD98LC / hLAT1 / p21 / WAF1 / Cip1 / 肝 |
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| Research Abstract |
内分泌撹乱物質は、ヒトや野生動物の内分泌機能を撹乱し生殖障害や悪性腫瘍を引き起こす。この中で、ダイオキシンは極めて低い濃度で内分泌撹乱作用を示す。しかしながら、これまでの多くの研究にもかかわらず、分子レベルでのダイオキシンの作用機序は不明な部分が多い。そこで、本研究では、ダイオキシンの作用機序を明らかにする目的で、RDA(Representational Difference Analysis)法を用いて、ダイオキシンにより肝細胞で発現が変化する遺伝子のクローニングを行った。cDNA RDA法は、2つのcDNA集団から、どちらか一方の集団にのみ存在するcDNAを、PCR法を用いてクローニングする方法である。したがって、2つのDNA集団として、ダイオキシンで処理した細胞のmRNAから合成したcDNA集団と未処理の細胞のcDNA集団を用いた場合には、ダイオキシンにより発現が促進あるいは抑制される遺伝子をクローニングすることが可能である。我々は、蛋白合成阻害剤存在下で1nMの2,3,7,8-tetrachloro-dibenzo-p-dioxin(TCDD)をヒト肝癌細胞株HepG2に添加し、そのcDNAを用いてRDA法を行い、ダイオキシンに直接応答するcDNAをクローニングした。次に、Northern blot法やWestern blot法を用いてこれらの遺伝子発現を詳細に検討し、E16/CD98LC/hLAT1と呼ばれるmultifunctionalな蛋白とp21/WAF1/Cip1がTCDDにより増加することを見出した。E16はL-型アミノ酸トランスポーターのサブユニットで、TCDDにより放射性ロイシンの細胞取り込みが増加した。このトランスポーターは甲状腺ホルモンの取り込みにも重要であることが知られ、TCDDは甲状腺ホルモン作用にも影響を及ぼすことが示唆された。一方、p21は細胞周期の調節に重要な蛋白である。本研究によりTCDDのヒト肝細胞に対する新しい作用が明らかにされた。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] SARKAR Devanand, OHMORI Sachiko et.al: "The human homolog of Diminuto/Dwarf1 gene (hDiminuto) : A novel ACTH-responsive gene overexpressed in benign cortisol-producing adrenocortical adenomas"Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 86(11). 5130-5137 (2001)
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[Publications] SARKAR Devanand, OHMORI Sachiko et.al: "Overexpression of glutathione-S-transferase A1 in benign adrenocortical adenomas from patients with Cushing's syndrome"The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 86(4). 1653-1659
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[Publications] CAO Xia, OHMORI Sachiko et. al: "Calcineurin-mediated regulation of ZAKI-4 gene expression in osteoblast-like ROS17/2.8 cells"Environmental Medicine. 45(1). 20-25 (2001)
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[Publications] OHMORI Sachiko, KAMBE Fukushi et. al: "Effects of estrogen on tail suspension-induced disuse atrophy in ovariectomized rats : evaluation of the expression of interleukin-6 mRNA in the femur"Environmental Medicine. 45(1). 12-14 (2001)
