核内ホルモン受容体コアクティベータを介する転写調節機構への環境化学物質の影響

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11839031
• Research Institution: Okinaka Memorial Institute for Medical Research
• Principal Investigator: 小澤 安則 (財)冲中記念成人病研究所, 研究員 (10124306)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 紫芝 良昌 (財)冲中記念成人病研究所, 研究員 (00072596) ; 田口 学 (財)冲中記念成人病研究所, 研究員 (00265141) ; 竹下 章 (財)冲中記念成人病研究所, 研究員 (20322646)
• Keywords: 内分泌かく乱物質 / 環境化学物質薬剤 / ビスフェノールA / 核内ホルモン受容体 / SXR / CYP3A4 / コアクティベーター / SRC-1

Research Abstract

ビスフェノールA(BPA)はポリカーボネート樹脂、エポキシ樹脂などの原料としてひろく利用されているが、エストロゲン受容体に低親和性ながら結合してエストロゲン活性を持つことから内分泌撹乱物質のひとつとして最近注目されている。
チトクロームP450-3A4(CYP3A4)は肝におけるステロイドホルモン、脂肪酸、さらに薬剤などの化学物質の代謝に重要な酵素である。近年、オーファン受容体であるステロイド・ゼノバイオティク受容体(SXR)がクローニングされ、CYP3A4の酵素誘導をおこす種々の薬剤や化学物質がSXRにリガンドとして結合し、CYP3A4プロモーターのゼノバイオティク応答配列上(XRE)でCYP3A4の転写を活性化することが明らかとなった。そこで我々は、ヒトSXRcDNAとCYP3A4の上流域を組み込んだルシフェレースレポーター、(XRE)-CYP3A4-LUCをヒト肝臓由来のHepG2細胞へトランスフェクトし、レポーターアッセイをおこなって、BPAがヒトSXRを介して転写を活性化するかどうかを検討した。その結果、BPAやフタル酸化合物(DEHP)によりCYP3A4の転写が活性化されることが判明した。マウスのSXRではBPAは転写を活性化しないことが知られているが、この種差の理由としてヒトとマウスのSXRのホモロジーが約77%と低いためと考えられた。また、哺乳細胞を用いた2ハイブリッドアッセイによりBPAがSXRと核内受容体のコアクティベーターであるSRC-1との結合を促進したことから、BPAがリガンドとしてSXRに結合しSRC-1との結合をリクルートするものと考えられた。
以上より、BPAはエストロゲン受容体のみでなくヒトSXRのリガンドとして作用しステロイドホルモン、脂肪酸、さらに薬剤などの化学物質の代謝に影響を与える可能性が示唆された。

Research Products

• [Publications] Taguchi M,Kanno H,Kubota R,Miwa S,Shishiba Y,Ozawa Y: "Molecular cloning and expression profile of rat myocilin."Mol Genet Metab. 70(1). 75-80 (2000)
• [Publications] Takeshita A,Ozawa Y,Chin WW: "Nuclear receptor coactivators facilitate vitamin D receptor homodimer action on direct repeat hormone response elements."Endocrinology. 141(3). 1281-4 (2000)