IL-10遺伝子移入によるラット同種移植肝絶反応の制御に関する分子病理学的研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11877040
• Research Institution: Tottori University
• Principal Investigator: 井藤 久雄 鳥取大学, 医学部, 教授 (60127610)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 八幡 浩 広島大学, 医学部, 助教授 (10191181) ; 佐藤 建三 鳥取大学, 医学部, 教授 (40113196)
• Keywords: ラット肝移植 / 拒絶反応 / IL-10遺伝子導入 / アデノウイルス / 免疫抑制

Research Abstract

1.CMVプロモーターで制御されるヒトIL-2遺伝子組み換えアデノウイルス・ベクターAdCMVhIL10の作製した。なお、大腸菌のβ-galactosidase遺伝子組み換えアデノウイルス・ベクター(AdCMVlacZ)を正常ラットの尾静脈から1.5×10^9pfuの力価で注入したところ、大部分の肝細胞に当該遺伝子の発現を確認した。
2.4週齢雄DAラット肝を摘出し、同Lewisラットに同所性に移植した。移植24時間前に回盲腸静脈から1×10^<10>pfuのAdCMVhIL-10を注入し、移植後3日目に下大静脈および上大静脈から血清を採取し、ヒトIL-10濃度を測定した。注入群(n=3)では非注入群(n=4)に比較して約15倍であり(137.5±8.0pg/ml)、しかも、上大静脈において有意に高濃度であった。
3.ラット肝移植は次の3群に分類して、生存日数および病理組織学的検討を行った。1群:非移植群(n=5)と2群:AdCMVlacZ投与群(n=5)では、最長生存日数14日、平均生存日数は何れも11日であった。死亡時の病理組織学的検討では、移植肝は何れも広範な出血性壊死に陥っていた。比較的大きな肝動脈では、急性移植動脈炎を示しており、血栓形成を伴っていた。3群の移植AdCMVhIL-10投与群(n=5)の生存日数は最短56日であり、2匹では100日を越えた。死亡時ないし犠牲死させたラットの移植肝では、グリソン鞘が線維化を示していたが、リンパ球浸潤は乏しく、また、小葉間胆管が増生していた。以上より肝移植24時間前のAdCMVIL-10注入は、その後の免疫抑制を行わなくても、拒絶反応を制御することが明らかとなった。
4.移植後の各種肝機能検査を経時的に行った。3群では移植後3日目には総ビリルビン値が0.2±0.0と正常値まで低下した。1群、2群では逸脱酵素およびビリルビン値とも低下することなく、死亡時まで上昇した。

Research Products

• [Publications] Fudaba Y,Ito H et al: "Oral administration of geranylgeranylacetone protects rat livers from warm ishemic injury"transplant Proc.. 31(7). 2918-2919 (1999)
• [Publications] Shinozaki K,Ito H,et al: "Allograft transduction of IL-10 prolongs survival following orthotopic liver transplantation"Gene Ther.. 6(5). 816-822 (1999)
• [Publications] Sanada O,Ito H,et al: "Chimeric liver established by recipient type bone marrow cell transplantation to donor before to liver transplantation produces marked suppression of allograft rejection in rats"Transplant Proc.. 31(1-2). 704-706 (1999)