0-TRAPはマラリア原虫の蚊細胞への侵入を介在する接着分子か?

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11877045
• Research Institution: Mie University
• Principal Investigator: 鎮西 康雄 三重大学, 医学部, 教授 (60024709)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 油田 正夫 三重大学, 医学部, 助手 (90293779)
• Keywords: ネズミマラリア / オオキネート / CTRP / TRAP / 免疫電顕 / micromneme / ハマダラカ / 中腸

Research Abstract

ネズミマラリアPlasmodium berghei(Pb),ハマダラカAnopheles stephensi(As)を用いて以下の実験を行なった。O-TRAPはより一般的なCTRP(cis-trap related protein)という呼称をこの報告では使うことにする。
1.我々はすでにCTRPをノックアウトしたPb原虫の作製に成功し、CTRP-KO原虫のクローンを得ているが、これらのKO原虫はookineteは正常に出来るが、oocyst形成が出来ないことを示した。すなわちCTRPはookineteが蚊の中腸に侵入するためのkey moleculeであることが示唆された。それ以外のステージで機能するかどうかを確かめるための実験を行い、oocyst-sporozoiteーasexaul stagesの全てにわたり、CTRPがなくても発育出来ることが判った。
2.Pb CTRPに対する抗体を用いて、光顕免疫組織化学を行い、ookineteの細胞質が特異的に染まることを観察した。また同じPbの抗体を用いて、他のマラリア原虫種ネズミマラリア原虫P.yoelli,ヒトマラリアの三日熱マラリア原虫P.vvivax,トリマラリアP.gallinaciumのookineteについて免疫組織化学を行ったところ、よく染まり、共通の抗原因子が存在することが判った。
3.免疫電顕によるCTRPの局在の解析した。感染マウスの血液を培養し、ookineteを形成させ、種々ステージの原虫を固定し、電顕用試料として調整し、CTRPの抗体(細胞質ドメインに対する抗体)を用いて電顕免疫組織化学を行なった。その結果、CTRPはookineteのmicroneme特異的に分布することが判った。CTRPがmicronemeタンパクの一つであることを確認した。

Research Products

• [Publications] Masao Yuda et.al: "Structure and expression of an adhesive protein-like molecule of mosquito invasive-stage malarial parasite"J.Exp.Med.. 189. 1947-1952 (1999)
• [Publications] Masao Yuda et.al: "Targeted disruption of the Plasmodium berghei CTRP gene reveals its essential role in malaria infection of the vector mosquito"J.Exp.Med.. 190. 1711-1715 (1999)
• [Publications] Katsuhiko Ando et,al: "Sporozoite invasion of Plasmodium berghei,rodent malaria parasite,to the salivary glands of vector mosquito,Anopheles stephensi"J.Trop.Med.. 27. 7-12 (1999)
• [Publications] Jun Fu et al.: "Epitope-specific impairment of production of antibody against merozoite surface glycoprotein 1 of Plasmodium in symptomatic with"Parasitol.Res.. (in press). (2000)